[发明专利]一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检测方法

说明书

本发明提供了一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检测方法，其中偶氮二异丁腈是伏立康唑合成过程中使用的物料，可能残留在伏立康唑消旋体（以下简称伏立康唑M3）中，因此需要对伏立康唑M3中可能残留的偶氮二异丁腈进行研究。偶氮二异丁腈在伏立康唑M3中的检测是由GC‑MS方法实现的，为验证该方法的有效性和可行性，根据ICH‑Q2指导原则对该方法进行验证。该方法在专属性、精密度、准确度、线性和范围和耐用性都符合标准，且该方法操作简单，耗时少，并且得到的数据准确有效，具有较高的系统适用性。

技术领域

本发明涉及医药原料药中技术分析领域，具体涉及一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检验方法。

背景技术

伏立康唑（VRZ）是具有广谱抗真菌活性的第二代三唑类抗真菌药物，是侵袭性曲霉感染和克柔念珠菌感染的一线治疗药物，其抗菌谱广，抗菌活性高，是深部曲霉菌感染首选，经验性抗真菌治疗的首选。麦角甾醇是真菌保持细胞膜的结构完整和发挥膜相关蛋白功能所必需的重要成分。伏立康唑通过阻止羊毛甾醇转化成为麦角甾醇，使真菌细胞膜合成受到阻碍，破坏真菌细胞的完整性，最终导致真菌细胞破裂凋亡。伏立康唑作为新型三唑类抗真菌药，具有更广的抗菌谱和明显的药动学优势，在临床应用中具有更大的优势。

伏立康唑制备的过程中，偶氮二异丁腈是合成过程中使用的物料，其反应可能不完全而残留在伏立康唑消旋体（以下简称伏立康唑M3）中，因此需要对伏立康唑M3中可能残留的偶氮二异丁腈进行研究。本发明首次提出了一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检测方法，该检测方法是由GC-MS方法实现的，为验证该方法的有效性和可行性，根据ICH-Q2指导原则对该方法进行验证。

发明内容

本发明首次提出了一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检测方法，该检测方法是由GC-MS方法实现的，该方法操作简单，耗时少，并且得到的数据准确有效，具有较高的系统适用性，具体如下：

一种伏立康唑M3中偶氮二异丁腈的检验方法，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、偶氮二异丁腈储备液、对照品溶液、灵敏度溶液和供试品溶液；所述空白溶液为盐酸水溶液和二氯甲烷溶液；所述偶氮二异丁腈储备液包括偶氮二异丁腈和稀释液；对照品溶液中包括偶氮二异丁腈、稀释液、盐酸水溶液和二氯甲烷溶液；所述灵敏度溶液中包括偶氮二异丁腈、稀释液、盐酸水溶液和二氯甲烷溶液；所述供试品溶液中包括伏立康唑、盐酸水溶液和二氯甲烷溶液；

（2）测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液和供试品溶液注入气相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：色谱柱：（6%-氰丙基-苯基）-94%甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱；柱温：初始柱温为70℃，保持1min，以12℃/min的速率升温至150℃，再以8℃/min的速率升温至200℃，再以20℃/min的速率升温至250℃；进样口温度：220℃；载气：He；分流模式：分流；载气流速：1.5ml/min；分流比：5:1；进样量：1μl；

MS条件如下：

进一步地，所述空白溶液的配制步骤为：取离心管，加入盐酸水溶液，再加入二氯甲烷，涡旋静置；取下层二氯甲烷层用滤膜过滤，作为空白溶液；

所述偶氮二异丁腈储备液的配制步骤为：取偶氮二异丁腈对照品，精密称定，置容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液，置容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀即得偶氮二异丁腈储备液；

所述对照品溶液的配制步骤为：精密量取偶氮二异丁腈储备液，置容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；取离心管，加入盐酸水溶液，再加入上述二氯甲烷溶液，涡旋静置；取下层二氯甲烷层用滤膜过滤，作为对照品溶液；

所述灵敏度溶液的配制步骤为：精密量取偶氮二异丁腈储备液，置容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀。取离心管，加入盐酸水溶液，再加入上述二氯甲烷溶液，涡旋静置；取下层二氯甲烷层用滤膜过滤，作为灵敏度溶液；