[发明专利]一种提高籼稻成熟胚愈伤组织诱导的前处理方法有效

专利信息
申请号: 202011336591.1 申请日: 2020-11-25
公开(公告)号: CN112400693B 公开(公告)日: 2022-02-18
发明(设计)人: 张维林;杨玲;金海芳;李双香 申请(专利权)人: 浙江师范大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00;A01C1/08
代理公司: 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 代理人: 宋红宾
地址: 321004 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 籼稻 成熟 胚愈伤 组织 诱导 处理 方法
【权利要求书】:

1.一种提高籼稻成熟胚愈伤组织诱导的前处理方法,包括:

籼稻成熟胚去壳;

前处理试剂配制;

成熟胚前处理;以及

成熟胚消毒;

其中:成熟胚前处理为:去壳的籼稻成熟胚清水洗净,再以无菌水漂洗3-5次,随后采用质量浓度0.5%-1%的30%的三氯异氰尿酸溶液于25~37℃下浸泡8-12h,结束后以无菌水漂洗3-5次,使用无菌滤纸吸干种子。

2.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:

所述前处理试剂由30%的三氯异氰尿酸复合物和灭菌水,按照质量比配制成质量浓度为0.5%-1%的三氯异氰尿酸溶液。

3.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:

所述成熟胚消毒包括:

75%酒精处理无菌滤纸吸干的水稻种子2min,无菌水漂洗2-3次;

5-10%的次氯酸钠消毒15-20min,或0.15%的氯化汞消毒12min,无菌水漂洗2-3次;

无菌滤纸吸干种子,接种至愈伤组织诱导培养基。

4.根据权利要求3所述的前处理方法,其中:

所述愈伤组织诱导培养基由如下方法制得:

向NB基本培养基中加入4mg/L的2,4-D、30g/L的蔗糖、2.7g/L的植物凝胶phytagel,并调节pH值至5.8。

5.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:

前处理结束后,成熟胚消毒,每诱导培养基平皿接种10-12粒种子,每处理接种3皿,接种21天,统计不同浓度浸泡不同时间成熟胚的出愈率并称量愈伤组织的重量 。

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