[发明专利]一种提高籼稻成熟胚愈伤组织诱导的前处理方法有效
申请号: | 202011336591.1 | 申请日: | 2020-11-25 |
公开(公告)号: | CN112400693B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 张维林;杨玲;金海芳;李双香 | 申请(专利权)人: | 浙江师范大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01C1/08 |
代理公司: | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人: | 宋红宾 |
地址: | 321004 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 籼稻 成熟 胚愈伤 组织 诱导 处理 方法 | ||
1.一种提高籼稻成熟胚愈伤组织诱导的前处理方法,包括:
籼稻成熟胚去壳;
前处理试剂配制;
成熟胚前处理;以及
成熟胚消毒;
其中:成熟胚前处理为:去壳的籼稻成熟胚清水洗净,再以无菌水漂洗3-5次,随后采用质量浓度0.5%-1%的30%的三氯异氰尿酸溶液于25~37℃下浸泡8-12h,结束后以无菌水漂洗3-5次,使用无菌滤纸吸干种子。
2.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:
所述前处理试剂由30%的三氯异氰尿酸复合物和灭菌水,按照质量比配制成质量浓度为0.5%-1%的三氯异氰尿酸溶液。
3.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:
所述成熟胚消毒包括:
75%酒精处理无菌滤纸吸干的水稻种子2min,无菌水漂洗2-3次;
5-10%的次氯酸钠消毒15-20min,或0.15%的氯化汞消毒12min,无菌水漂洗2-3次;
无菌滤纸吸干种子,接种至愈伤组织诱导培养基。
4.根据权利要求3所述的前处理方法,其中:
所述愈伤组织诱导培养基由如下方法制得:
向NB基本培养基中加入4mg/L的2,4-D、30g/L的蔗糖、2.7g/L的植物凝胶phytagel,并调节pH值至5.8。
5.根据权利要求1所述的前处理方法,其中:
前处理结束后,成熟胚消毒,每诱导培养基平皿接种10-12粒种子,每处理接种3皿,接种21天,统计不同浓度浸泡不同时间成熟胚的出愈率并称量愈伤组织的重量 。
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