[发明专利]一种快速检测环境沉积物中高血压药物痕量残留的方法

权利要求书

1.一种快速检测环境沉积物中高血压药物痕量残留的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）样品前处理：向采集的沉积物样品中加入微生物抑制剂，冷冻干燥，研磨均匀并过筛，得到前处理后的样品，所述的微生物抑制剂为叠氮化钠，叠氮化钠的加入量为每500 mL的沉积物样品加入1 g叠氮化钠；

（2）提取：向前处理后的样品中先加入内标溶液，再加入高纯水和乙腈，然后加入盐析试剂，手摇震荡提取90 s，然后3040 g条件下离心15 min，取8.0 mL上清液，加入分散固相萃取试剂，手摇震荡净化30 s，然后3040 g条件下离心15 min，取5 mL上清液浓缩，用甲醇重新定容混合均匀，过微孔滤膜，转移至进样小瓶，得到待测样品溶液，所述的内标溶液为阿替洛尔-d₇和美托洛尔-d₇，高纯水的加入量为每1 g样品加入5.0-6.0 mL高纯水，乙腈的加入量为每1 g样品加入10.0 mL乙腈，乙腈中含有质量分数为1%的乙酸，所述的盐析试剂由无水硫酸镁和无水乙酸钠组成，所述的无水硫酸镁和无水乙酸钠的质量比为7:1.5，所述的分散固相萃取试剂由无水硫酸镁、PSA和C18组成，所述的无水硫酸镁、PSA和C18的质量比为20:4:3；

（3）配制标准工作溶液：分别精密称取美托洛尔、普萘洛尔、阿替洛尔、厄贝沙坦、硝苯地平和2种同位素内标物质的标准物质，分别配制成标准储备溶液，通过梯度稀释配制得到标准工作溶液，以内标法建立标准工作曲线；所述的同位素内标物质为阿替洛尔-d₇和美托洛尔-d₇；

（4）超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪检测：步骤（2）中的样品溶液和步骤（3）中的标准工作溶液氮气下轻轻吹至近干，用含5 mM乙酸铵的甲酸水溶液与甲醇的混合溶液重新溶解，甲酸水溶液的质量分数为0.2%，然后在相同条件下，通过超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪测定；

超高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱，规格为50mm × 2.1 mm、1.8 μm，柱温为40 ℃，流速为0.3 mL/min，进样体积为5 μL；流动相为含5mmol/L乙酸铵和0.2%甲酸的A相水溶液和B相甲醇，总运行时间8 min，后运行时间4 min，用于平衡液相色谱柱，梯度洗脱程序如表1所示：

质谱条件为：离子源为电喷雾离子源ESI+；扫描模式为多反应监测模式MRM；干燥气温度为350 ℃；干燥气流速为8 L/min；鞘气温度为350 ℃；鞘气流速为12 L/min；雾化器压力为45 psi；喷嘴电压为500 V；毛细管电压为4500 V；

选择特定的一组母离子和子离子作为定量离子，同时选择特定的一组母离子和子离子作为定性离子；所述的母离子为目标物质和一个氢离子的加和离子；5种高血压药物保留时间、母离子、子离子、碎裂电压、碰撞能及所采用的同位素内标如表2所示，带*的为定量离子所选用的子离子；

以目标高血压药物定量离子对的峰面积与对应同位素内标定量离子对的峰面积的相对比值Y为纵坐标，标准曲线工作溶液相对浓度X为横坐标，建立标准工作曲线；通过样品溶液中目标高血压药物定量离子对的峰面积与对应同位素内标定量离子对的峰面积的相对比值，得到样品溶液中目标高血压药物的浓度，从而获得沉积物样品中目标高血压药物的含量。

2.根据权利要求1所述的快速检测环境沉积物中高血压药物痕量残留的方法，其特征在于，步骤（3）所述的标准工作曲线的梯度浓度分别为5.0 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L和200 μg/L。