[发明专利]一种检测SARS-CoV-2抗原的试剂盒、方法以及用途

说明书

本申请涉及一种用于检测SARS‑CoV‑2抗原的试剂盒、方法及用途。本申请利用SARS‑CoV‑2抗原与人血管紧张素转化酶II(ACE2)蛋白具有高亲和力的特性，包被有所述ACE2蛋白、多肽或蛋白片段的固相载体用作捕获组分，其与样本中的SARS‑CoV‑2抗原进行结合，同时标记有可检测的信号标记物的SARS‑CoV‑2刺突蛋白S1亚基蛋白用作检测组分，其与待测样本中SARS‑CoV‑2抗原竞争ACE2上的结合位点；或者包被有SARS‑CoV‑2刺突蛋白S1亚基蛋白的固相载体用作捕获组分，同时标记有可检测的信号标记物的ACE2蛋白、多肽或蛋白片段用作检测组分，包被在固相载体上的SARS‑CoV‑2刺突蛋白S1亚基蛋白与待测样本中SARS‑CoV‑2抗原竞争ACE2上的结合位点，最终通过信号标记物产生的信号值的高低确定待测样本中SARS‑CoV‑2抗原的含量。

技术领域

本申请涉及一种用于检测SARS-CoV-2抗原的试剂盒、一种用于检测 SARS-CoV-2抗原的方法以及试剂盒在检测SARS-CoV-2抗原中的用途。

背景技术

2020年1月7日，致病病原被鉴定为一种新型冠状病毒，随后进行了基 因序列分析并开发了检测方法。2020年2月11日，世界卫生组织(WHO) 正式将新型冠状病毒引发的疾病命名为COVID-19，同时国际病毒分类委员 会正式将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2。

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)为单股正链RNA病毒，属于β属的冠状病 毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60～140nm。人感染新 型冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在 较严重的病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死 亡。2020年1月10日，SARS-CoV-2的第一个基因组序列数据被公布，后来 陆续有多个从患者身上分离的病毒基因组序列发布。徐心恬等(Xintian Xu等，SCIENCE CHINA LIFE SCIENCES，2020)通过遗传进化分析，推测 SARS-CoV-2的自然宿主与SARS一样为蝙蝠，通过分子结构模拟计算，得 出SARS-CoV-2是通过其刺突蛋白(SpikeProtein，S蛋白)的S1亚基上受 体结合区(receptor binding domain，RBD)与人血管紧张素转化酶II(ACE2) 相互作用的分子机制，来感染人呼吸道上皮细胞。中科院武汉病毒所石正丽 团队(Zhou P等，Nature，2020)通过体外实验发现SARS-CoV-2能感染过 表达人ACE2的非敏感细胞，表明SARS-CoV-2可以利用SARS-CoV的相同 受体ACE2入侵细胞。美国研究人员(Daniel Wrapp等，Science，2020)通 过对SARS-CoV-2的S蛋白三聚体冷冻EM结构研究，进一步得出 SARS-CoV-2比SARS-CoV以更高的亲和力结合ACE2。

新型冠状病毒的体外检测及确诊目前主要采用实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法进行核酸检测。随着确诊人数的不断攀升，由于核酸检测 试剂阳性率过低，出现了大量高度疑似的病例连续核酸检测阴性而不能确诊 的情况；而大量疑似患者不能及时进行诊断，高危携带群体可能再次成为感 染源，对疫情的防控带来极大的不利影响。