[发明专利]慢病毒包装载体系统、慢病毒及其构建方法、试剂盒有效
申请号: | 202011342452.X | 申请日: | 2020-11-25 |
公开(公告)号: | CN112442514B | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 施金秀;罗燕;兰胜;叶知晟 | 申请(专利权)人: | 云舟生物科技(广州)股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/50 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 马小悦 |
地址: | 510663 广东省广州市广州高新技术产业开发区科*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 包装 载体 系统 及其 构建 方法 试剂盒 | ||
1.一种慢病毒包装载体系统,能产生只有一次感染能力而无复制能力的慢病毒,其特征在于,所述慢病毒包装载体系统为四质粒系统,包括包膜蛋白表达质粒、慢病毒包装表达质粒、gag-pol表达质粒及rev表达质粒,所述包膜蛋白表达质粒包含顺次连接的启动子、增强子、以及用于编码包膜蛋白的核酸片段,所述用于编码包膜蛋白的核酸片段为用于表达SARS-CoV-2的S蛋白的核酸片段或用于表达SARS-CoV-2的S蛋白的突变体的核酸片段,所述用于表达SARS-CoV-2的S蛋白的核酸片段的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示,所述用于表达SARS-CoV-2的S蛋白的突变体的核酸片段的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示;
所述增强子为β-珠蛋白的内含子,所述增强子的核苷酸序列如SEQ ID No:5所示;
所述包膜蛋白表达质粒、所述慢病毒包装表达质粒、所述gag-pol表达质粒及所述rev表达质粒的用量比为5μg:10μg:5μg:5μg。
2.根据权利要求1所述的慢病毒包装载体系统,其特征在于,所述启动子为巨细胞病毒启动子或CAG启动子。
3.一种慢病毒的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
使用权利要求1~2任一项所述的慢病毒包装载体系统转染宿主细胞,制备慢病毒。
4.一种试剂盒,其特征在于,包括表达ACE2受体的细胞株和权利要求1~2任一项所述的慢病毒包装载体系统。
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