[发明专利]一种抗右旋糖酐单克隆抗体D24及其应用

权利要求书

1.抗右旋糖酐单克隆抗体D24在测定糖产品中右旋糖酐酶酶活中的应用，其特征在于，所述的抗右旋糖酐单克隆抗体D24由保藏编号为CGMCC No.21002的葡聚糖杂交瘤细胞株D24产生。

2.一种测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）标准曲线的绘制；

（a）配制右旋糖酐酶酶活的标准系列溶液；

（b）将标准系列溶液各取1mL分别与100～300 mg/L右旋糖酐溶液混合，反应，沸水浴中止反应，得反应液1，冷却备用；

测量0.1～0.3 mg/mL权利要求1所述的抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液的散射浊度，即为反应前的散射浊度；向上述抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液中加入反应液1，混合反应1～3 min后测其散射浊度，即为反应后的散射浊度，反应前后的散射浊度之差即为散射浊度差；以右旋糖酐酶酶活为横坐标，以散射浊度差为纵坐标，建立右旋糖酐酶酶活标准曲线；

（2）样品的测定：将100～200 g/L待测样品溶液与100～300 mg/L右旋糖酐溶液混合，反应，沸水浴中止反应，得反应液2，冷却备用；

测量0.1～0.3 mg/mL权利要求1所述的抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液的散射浊度，即为反应前的散射浊度；向上述抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液中加入反应液2，混合反应1～3 min后测其散射浊度，即为反应后的散射浊度，反应前后的散射浊度之差即为散射浊度差；利用步骤（1）的标准曲线即可计算出待测样品溶液中的右旋糖酐酶酶活；

所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法的检出限为0.0000005U/mL。

3.根据权利要求2所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，所述的右旋糖酐酶酶活的标准系列溶液为0～0.00001U/mL的右旋糖酐酶酶活标准系列溶液。

4.根据权利要求3所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，所述的右旋糖酐酶酶活的标准系列溶液为0、0.000002 U/mL、0.000004 U/mL、0.000006 U/mL、0.000008 U/mL、0.00001 U/mL的右旋糖酐酶酶活标准系列溶液。

5.根据权利要求2所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，所述的右旋糖酐溶液以缓冲液为溶剂制备得到；

所述的缓冲液pH为4.5～6.5、0.1～0.2mol/L的缓冲液；

所述的缓冲液的种类包括磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中的至少一种。

6.根据权利要求2所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，

所述的右旋糖酐为分子量不低于50万的右旋糖酐；

所述的抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液以pH为7.2～7.4、0.1mol/L的PBS缓冲液为溶剂制备而成。

7.根据权利要求6所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，

所述的右旋糖酐为50万～200万的右旋糖酐。

8.根据权利要求7所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，

所述的右旋糖酐为右旋糖酐T-2000和右旋糖酐T-500中的至少一种。

9.根据权利要求2所述的测定糖产品中右旋糖酐酶酶活的方法，其特征在于，

步骤（b）中所述的标准系列溶液与右旋糖酐溶液按体积比1～2:1计算；

步骤（b）中所述的反应的条件为40～65℃反应0.5～2 h；

步骤（b）中所述的沸水浴中止反应的时间为5 min；

步骤（b）中所述的抗右旋糖酐单克隆抗体D24溶液与反应液1按体积比100 : 1～2计算。