[发明专利]一种大麻二酚有关物质的HPLC-PDA检测方法

说明书

本发明公开了一种大麻二酚有关物质的HPLC‑PDA检测方法，采用色谱条件如下：流动相包括流动相A与流动相B，流动相A为水，流动相B为乙腈；采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：0～8分钟，流动相A与流动相B的体积比由90:10线性变化为32:68；8～17分钟，流动相A与流动相B的体积比由32:68线性变化为18:82；17～30分钟，流动相A与流动相B的体积比维持为18:82；30～34分钟，流动相A与流动相B的体积比由18:82线性变化为0:100；34～44分钟，流动相A与流动相B的体积比维持为0：100；44～46分钟，流动相A与流动相B的体积比线性变化为90:10，并维持该体积比至60分钟。采用本发明方法的条件，主峰与相邻杂质峰能完全分离，各主要降解杂质峰之间也能完全分离，且主峰纯度高，杂质检出率高。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种大麻二酚有关物质的HPLC-PDA检测方法。

背景技术

大麻二酚最早于1940年从大麻(Cannabis sativa)中分离得到，其结构于1963年得以确证，为大麻中的非精神类成分，无致幻及成瘾性作用。大麻二酚(cannabidiol)作用广泛，具有镇痛、抗风湿性关节炎、抗癫痫、抗焦虑等药理活性，对任何认知系统不造成明显损害，同时，对老年痴呆、儿童自闭症、癌症、肝硬化等多种疾病的预防，均有显著的积极作用。同时，在保健品市场呈现多元化发展。

2018年6月25日美国FDA批准英国制药公司GWPharmaceuticals研制的口服液体制剂Epidiolex上市。该药用于辅助治疗两岁以上患儿Lennox-Gastaut综合征(LGS)和Dravet综合征(DS)相关的罕见癫痫。随着大麻二酚药用价值不断开发，急需开发一种实用，准确的大麻二酚原料药有关物质检测方法。

高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上发展起来的一种新的色谱技术。它具有高柱效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、重复性好、样品量少、应用范围广、自动化等优点。该法已成为现代分析技术的重要手段之一。二极管阵列检测器(PDA)是一种用于液相色谱检测的光学多通道检测器，它具有色谱峰纯度鉴定、光谱检索功能，可得到任意时间的光谱与任意波长的色谱图，光谱的引入在一定程度上弥补了色谱定性能力不足的缺陷。

国内外文献资料显示，大麻二酚现有检测方法主要是含量检测，含量检测的方法用于有关物质检测时达不到杂质分离要求，且研究集中在唾液、血液、毛发等生物样品和食品中。目前大麻二酚原料药有关物质的检测技术尚未公布。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种从植物中分离的大麻二酚有关物质的HPLC-PDA检测方法，该方法具有专属性、适用性与重复性。本发明的方法，主峰与相邻杂质峰能完全分离，各主要降解杂质峰之间也能完全分离，且主峰纯度高，杂质检出率高，并具有稳定性指导意义。

本发明采取的具体技术方案是：

一种大麻二酚有关物质的HPLC-PDA检测方法，采用色谱条件如下：

流动相包括流动相A与流动相B，流动相A为水，流动相B为乙腈；

采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：0～8分钟，流动相A与流动相B的体积比由90:10线性变化为32:68；8～17分钟，流动相A与流动相B的体积比由32:68线性变化为18:82；17～30分钟，流动相A与流动相B的体积比维持为18:82；30～34分钟，流动相A与流动相B的体积比由18:82线性变化为0:100；34～44分钟，流动相A与流动相B的体积比维持为0：100；44～46分钟，流动相A与流动相B的体积比线性变化为90:10，并维持该体积比至60分钟。

优选地，上述检测方法中，流速为0.5-1.0ml/min，优选0.8ml/min。

优选地，上述检测方法中，检测波长为210-230nm。