[发明专利]含硒键的ROS响应型地塞米松脂质体及其制备方法和应用

权利要求书

1.含硒键的ROS响应型地塞米松脂质体，其特征在于，所述脂质体包括ROS响应型Di-Se-PC磷脂、巨噬细胞高表达的叶酸靶向受体、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000和药物活性成分；并且，药物活性成分负载于ROS响应型Di-Se-PC磷脂纳米载体上，表面修饰有叶酸靶向受体和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000，以叶酸靶向受体为关节炎处巨噬细胞靶向剂；

其中，所述Di-Se-PC磷脂的结构式：

并且，所述脂质体为典型球形结构，均一大小，平均粒径为100～200nm，包封率89.96％～95.31％。

2.含硒键的ROS响应型地塞米松脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)ROS响应型Di-Se-PC磷脂的制备

取硒基丙酸、溴代十八烷按照摩尔比1：1溶于质量分数25％的甲醇溶液中，室温下反应48h，反应结束后用0.1M稀盐酸调节体系pH＝1，然后乙酸乙酯萃取、蒸发浓缩产物后过柱纯化产物得到白色固体，即为中间体；

甘油磷酸胆碱、羰基二咪唑和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯加入到含有上述中间体的二甲基亚砜溶液中，45℃条件下反应过夜，反应结束后蒸发浓缩反应液，在冰乙醚中沉淀析出产物，过滤后硅胶柱色谱纯化，得到淡黄色蜡状固体，即为ROS响应型Di-Se-PC磷脂；

2)ROS响应型地塞米松脂质体的制备

将步骤1)制备的ROS响应型Di-Se-PC磷脂、Dex、胆固醇和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)溶解于三氯甲烷与甲醇混合液(3：1，v/v)，旋转蒸发除去有机溶剂形成脂质薄膜，然后室温氮气吹干后加入生理盐水水化该脂质薄膜，经超声处理和0.22μm微孔滤膜过滤，得到ROS响应型地塞米松脂质体Dex@ROS-Lips，保存于4℃备用；

3)叶酸靶向ROS响应型地塞米松脂质体的制备

将溶解于生理盐水的DSPE-PEG2000-FA与步骤2)制备的Dex@ROS-Lips脂质体溶液在37℃温度下共孵育2h，置于截留分子量3500的透析袋中透析4h，除去未插入的DSPE-PEG2000-FA，制备得到Dex@FA-ROS-Lips，保存于4℃备用。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1)中甘油磷酸胆碱、羰基二咪唑、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯和步骤1)制备的中间体投料摩尔比为2.2～2.5：1.5～2：0.5～1：1。

4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤2)中ROS响应型Di-Se-PC磷脂、Dex、胆固醇与DSPE-PEG2000的质量比为1：0.1～0.5：0.3～0.5：0.2～0.4。

5.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤2)中脂质体水化温度为50～60℃、水化时间为0.5～1.5h。

6.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤3)中DSPE-PEG2000-FA与步骤2)制得的ROS响应型地塞米松脂质体Dex@ROS-Lips的质量比为0.02～0.05：1。

7.含硒键的ROS响应型地塞米松脂质体制备体内递送治疗类风湿性关节炎药物的应用。