[发明专利]谷胱甘肽转移酶检测试剂盒、制备方法及应用在审
| 申请号： | 202011357787.9 | 申请日： | 2020-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN112611727A | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 陈银芳;万蒙 | 申请（专利权）人： | 江西乐成生物医疗有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33;G01N1/38;G01N35/00 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 何世磊 |
| 地址： | 334000 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 谷胱甘肽 转移酶 检测 试剂盒 制备 方法 应用 | ||
1.一种谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：
第一试剂，包括缓冲液、2,4-二硝基氯苯、乙醇或甲醇、抗坏血酸氧化酶、表面活性剂和防腐剂；
第二试剂，包括缓冲液、还原型谷胱甘肽、稳定剂、表面活性剂及防腐剂。
2.根据权利要求1所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中的缓冲液为磷酸盐缓冲液、MOPS、MOPSO缓冲液、Tris缓冲液中的任一种，所述第二试剂中的缓冲液为磷酸盐缓冲液、MOPS、MOPSO缓冲液、Tris缓冲液中的任一种。
3.根据权利要求1所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为Triton X-100、吐温20中的一种或两者的组合。
4.根据权利要求1所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为TCEP、EGTA、EDTA-2Na及维生素C硬脂酸镁的一种或几种的组合。
5.根据权利要求1所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠或生物防腐剂。
6.根据权利要求1～5任一项所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂和所述第二试剂中缓冲液的浓度均为50～200mmol/L，所述2,4-二硝基氯苯的浓度为1～5mmol/L，所述抗坏血酸氧化酶的浓度为0.5～5KU/L，所述乙醇或甲醇的含量为8～20％，所述第一试剂和所述第二试剂中表面活性剂的含量均为0.2～0.8％，所述还原型谷胱甘肽的浓度为5～50mmol/L，所述稳定剂的浓度为5～20mmol/L，所述第一试剂和所述第二试剂中防腐剂的浓度均为0.1～1g/L。
7.根据权利要求1或2所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中的缓冲液调节pH值为6.0～7.5，所述第二试剂中的缓冲液调节pH值为3.0～7.5。
8.权利要求1～7任意一项所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
称取2,4-二硝基氯苯，缓慢加入乙醇或甲醇，超声溶解，得CDNB溶解液；
将抗坏血酸氧化酶、表面活性剂和防腐剂加入缓冲液中充分溶解；
再将CDNB溶解液加入搅拌状态下的缓冲液中，混合均匀，即得第一试剂；
将稳定剂溶于缓冲液中，得稳定剂缓冲液；
再加入还原型谷胱甘肽、表面活性剂及防腐剂充分溶解，即得第二试剂。
9.权利要求1～7任意一项所述的谷胱甘肽转移酶检测试剂盒的应用，其特征在于，包括以下步骤：
将所述第一试剂和所述第二试剂置于生化分析仪内，调节温度为37℃；
(1)、将样品与所述第一试剂混合反应，得反应液1，孵育300秒；
(2)、将步骤(1)所得的反应液1与所述第二试剂混合反应，得反应液2，孵育60秒；
(3)、读取步骤(2)所得的反应液2在340nm主波长和405nm副波长处19-25点的吸光度的变化速率值，通过与同样参数定标的标准液样品进行计算，从而得出谷胱甘肽转移酶的含量。
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