[发明专利]一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法

权利要求书

1.一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）血浆的样品处理：取含芦荟苦素的待测血浆，加入含内标芦荟新苷D的甲醇溶液涡旋沉淀，离心，取上清液为待检测样品；

（2）设定液相色谱条件为：采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为含0.1~1.0‰（v/v）甲酸水溶液，流动相B为甲醇，梯度洗脱程序为：

（3）设定质谱条件为：电喷雾离子源，负离子检测，喷雾电压4500V，喷雾温度为550 ºC；采用多反应离子监测扫描模式，用于芦荟苦素定量分析的离子对为m/z 393.1 →272.9，内标化合物芦荟新苷D离子对m/z 为555.3 →144.9；

步骤（1）中，所述含内标芦荟新苷D的甲醇溶液与血浆按体积比2-4：1进行混合；

步骤（2）中，采用填料为C18的色谱柱，为Synergi Hydro-Rp色谱柱、Luna Omega C18色谱柱、Kinetex Evo C18色谱柱中的一种；

所述多反应离子监测的参数为：

。

2.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤（1）中，所述含内标芦荟新苷D的甲醇溶液的浓度为50ng/mL~100ng/mL。

3.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤（1）中，所述涡旋的转速为2000rpm，时间为10min；所述离心的条件：13000rpm、4℃离心10min。

4.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤（2）中，所述色谱柱的规格为2.10mm×50mm，填充剂粒径为2-5µm。

5.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，色谱条件：柱温28~40℃，进样量1~10µL，流速0.40~0.60mL·min^-1。

6.根据权利要求1所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，质谱条件：GS1为30-100psi，GS2为30-100psi，帘气为20-50psi，碰撞气为1-8psi。

7.根据权利要求5所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，所述柱温为30℃，进样量为5µL，流速为0.50mL·min^-1。

8.根据权利要求6所述的一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，质谱条件：GS1为50psi，GS2为50psi，帘气为30psi，碰撞气为2psi。