[发明专利]一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法

说明书

本发明提供一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC‑MS/MS测定方法，包括以下步骤：(1)血浆的样品处理：取含芦荟苦素的待测血浆，加入含内标芦荟新苷D的甲醇溶液涡旋沉淀，离心，取上清液为待检测样品；(2)设定液相色谱条件为：采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为含0.1～1.0‰(v/v)甲酸水溶液，流动相B为甲醇；(3)设定质谱条件为：电喷雾离子源，负离子检测，喷雾电压4500V，喷雾温度为550℃，采用多反应离子监测扫描模式，用于芦荟苦素定量分析的离子对为m/z 393.1→272.9,内标化合物芦荟新苷D离子对m/z为555.3→144.9。本发明方法可更加快速、灵敏、准确地检测血浆中芦荟苦素。

技术领域

本发明涉及芦荟苦素技术领域，特别涉及一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法。

背景技术

芦荟苦素是一种色酮苷类物质，在百合科芦荟属多种植物中均有存在，在芦荟Aloe barbadensis Miller中的含量约为3‰左右。芦荟是一种应用历史悠久的传统中药，用其叶的汁液浓缩干燥后入药，具有泻下通便，清肝泻火，杀虫疗疳之功效。相关研究显示，芦荟苦素是芦荟的重要活性物质之一。芦荟苦素可以抑制酪氨酸酶活性，阻止黑色素的合成，具有美白功效。芦荟苦素可以调节细胞炎症因子和生长因子释放，产生抗炎作用；诱导Smad和MAPK信号蛋白的激活，促进伤口愈合。芦荟苦素还可以激活WNT信号通路，下调Nortch信号通路，调节消化系统功能，改善结肠炎大鼠病理状态。

含芦荟苦素的芦荟提取物可以促进脂联素的分泌，调节实验动物糖脂代谢，有抗糖尿病作用。毒理学研究表明，芦荟苦素基本无毒副作用。然而，芦荟苦素的药代动力学研究很少，有关报道没有提供药代动力学参数，所用分析技术也已相对落后。本发明人力求建立一种更加快速、灵敏的芦荟苦素分析方法，并应用于药动学研究。

发明内容

鉴于此，本发明提出一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，可更加快速、灵敏、准确地检测血浆中芦荟苦素，可更好地应用于药动学研究。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC-MS/MS测定方法，包括以下步骤：

(1)血浆的样品处理：取含芦荟苦素的待测血浆，加入含内标芦荟新苷D的甲醇溶液涡旋沉淀，离心，取上清液为待检测样品；

(2)设定液相色谱条件为：采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为含0.1～1.0‰(v/v)甲酸水溶液，流动相B为甲醇，梯度洗脱程序为：