[发明专利]一种树脂及其制备方法以及其在制备头尾环肽中的应用

权利要求书

1.一种树脂，其特征在于其结构通式如下所示：

2.一种权利要求1所述树脂的制备方法，其特征在于：

通过对2-氯三苯甲基氯树脂依次进行二硫醇试剂修饰、二(溴甲基)苯修饰和巯基乙胺修饰后获得的，包括如下步骤：

步骤1：二硫醇试剂修饰2-氯三苯甲基氯树脂

80μmol的2-氯三苯甲基氯树脂在含有30％TFA的DCM中处理一段时间后，再与溶解在DCM的二硫醇试剂反应多次，直至树脂颜色由深红色变为浅黄色；

步骤2：树脂上未反应基团的封闭

在DCM洗涤树脂4次后，加入混合溶剂MeOH/DIEA/DCM，常温震荡30分钟；

步骤3：树脂上形成二硫键的还原

在DCM洗涤树脂4次后，加入混合溶剂β-ME/DIEA/NMP，常温震荡30分钟；

步骤4：二(溴甲基)苯修饰树脂

依次用DCM和DMF洗涤树脂，加入现配制的混合溶剂二(溴甲基)苯/DIEA/DMF反应混合液，常温震荡1小时；

步骤5：巯基乙胺修饰树脂

用DMF洗涤树脂，然后加入现配制的混合溶剂巯基乙胺/DIEA/DMF，常温震荡1小时；

步骤6：树脂上未反应基团的封闭

用DMF洗涤树脂，加含20％哌啶的DMF溶液，常温震荡30分钟；

步骤7：树脂上未反应基团的再次封闭

用DMF洗涤树脂，加入混合溶剂MTG/DIEA/NMP，常温震荡30分钟后，用DMF洗涤树脂4次，得到目标产物树脂。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤1中，所述二硫醇试剂包括1，2-乙二硫醇、1，3-丙二硫醇、1，4-丁二硫醇、1，5-戊二硫醇、1，6-己二硫醇、1，8-辛二硫醇、3,6-二氧杂-1,8辛烷二硫醇、1，9-壬二硫醇、1,10-癸二硫醇、1，11-十一二硫醇、1，16-十六二硫醇。

4.一种权利要求1所述树脂的应用，其特征在于：

将其用于制备含有不同链长和结构的硫醚键键合的头尾环肽，以优化头尾硫醚键键合环肽的硫醚连接臂结构，包括如下步骤：

(1)对一个特定序列的多肽，利用所述树脂，通过标准的Fmoc多肽固相合成进行多肽的拼接；

(2)在完成N末端氨基酸的拼接后，用20％哌啶的DMF脱除N末端Fmoc基团，随后在缩合剂的存在下，采用封闭试剂封闭N末端氨基；

(3)使用三氟乙酸切割液将多肽从树脂上切割，冰乙醚沉淀，获得粉末状态的多肽；

(4)将步骤(3)得到的多肽粗品溶解在有机溶剂中，常温震荡2小时后，利用反相液相色谱进行分析与目标肽的纯化分离；

所述有机溶剂为DMF和H₂O按体积比2:1的比例复配构成，或者为DMSO。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述封闭试剂包括氯乙酸、溴乙酸或碘乙酸。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述有机溶剂的酸度通过加入NH₄HCO₃调节到pH＝8～9。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述头尾环肽是通过N端溴乙酰基团、氯乙酰基或碘乙酰基与C末端巯基的烷基化反应而制备的，在N末端氨基与C端羧基之间通过如下结构的连接臂实现共价交联：