[发明专利]一种检测乳中2’-岩藻糖基乳糖的方法

权利要求书

1.一种检测乳中2’-岩藻糖基乳糖的方法，包括以下步骤：

样品前处理步骤：在液态乳或将乳粉溶于水获得的乳粉溶液中，加入蛋白质沉淀剂沉淀蛋白，然后过滤；

样品净化步骤：利用滤膜和净化柱对样品进行净化；

样品检测步骤：通过阴离子交换色谱进行测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述蛋白质沉淀剂选自酸溶液或有机溶剂。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述酸溶液为磺基水杨酸溶液或醋酸溶液，所述有机溶剂为乙醇或乙腈；优选地，所述蛋白质沉淀剂为磺基水杨酸溶液，更优选地，磺基水杨酸溶液的浓度为1wt％5wt％。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，过滤之前进行超声提取或振荡提取，优选地，超声提取或振荡提取的时间为5-15min。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述净化柱依次采用甲醇和水进行活化；所述净化柱为DionexOnGuard II RP净化柱。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述滤膜为0.45μm滤膜。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述阴离子交换色谱的流动相A为去离子水，流动相B为NaOH溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述阴离子交换色谱的流动相A为去离子水，流动相B为100-300mM NaOH水溶液。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，阴离子交换色谱采用二元梯度洗脱：第一阶段采用体积比为50％-60％流动相A和30％-40％流动相B，洗脱时间15-25分钟；第二阶段采用体积比为90％-100％流动相B；洗脱用时5-15分钟，第三阶段采用体积比为50％-60％流动相A和30％-40％流动相B，洗脱时间5-15分钟。

10.根据权利要求8所述的方法，其中，阴离子交换色谱采用二元梯度洗脱：第一阶段采用体积比为60％流动相A和40％流动相B，洗脱时间15-25分钟；第二阶段采用体积比为100％流动相B；洗脱用时5-15分钟，第三阶段采用体积比为60％流动相A和40％流动相B，洗脱时间5-15分钟。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，阴离子交换色谱采用二元梯度洗脱：0～20min流动相A为60％，流动相B为40％；

20～20.1min流动相A为60％～0％，流动相B为40％～100％；

20.1～30min流动相A为0％，流动相B为100％；

30～30.1min流动相A为0％～60％，流动相B为100％～40％；

30.1～40min流动相A为60％，流动相B为40％。

12.根据权利要求1所述的方法，其中，所述阴离子交换色谱的色谱柱为DIONEXCarboPacTM PA1柱或Dionex CarboPac PA20；检测器为电化学检测器；所述阴离子交换色谱的条件为：流动相流速0.8-1.0mL/min，柱温30-35℃，进样体积10-50μL。