[发明专利]一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和应用

权利要求书

1.一种生防细菌BTh05，其特征在于，所述生防细菌BTh05已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO. 20906，保藏日期为2020年10月19日，分类命名为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）。

2.一种含有如权利要求1所述的生防细菌BTh05的菌剂。

3.一种如权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的剂型为悬浮剂。

4.一种如权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活菌浓度不低于1.0×10¹⁰cfu/mL，室温条件下半年后菌剂中活菌数目不低于8.0×10⁹cfu/mL。

5.一种如权利要求2~4任一项所述的菌剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

（1）将-80℃保存的生防细菌BTh05菌株接种至固体LB培养基进行活化，在30℃±1℃条件下倒置培养16h或过夜培养，挑取单菌落并接种于液体LB培养基，30℃±1℃条件下震荡培养至对数期，获得用于发酵的种子液，作为种子液浓度不低于1.0×10⁸cfu/mL；

（2）室温条件下，将种子液以体积比1:10的接种量接种至发酵培养基，保证发酵培养体系中生防细菌BTh05菌体初始浓度不低于1.0×10⁷cfu/mL；

（3）按质量百分比向发酵完毕的发酵液中依次加入0.1%~0.2%表面活性剂﹑1%~2%防腐剂﹑4%~5%悬浮助剂﹑0.3%~0.4%增稠剂，添加过程中待每个添加剂完全溶解后再加入下一种添加剂，获得生防细菌BTh05菌剂。

6.一种如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）的发酵培养基包括玉米粉2%、豆粕粉1%、酵母粉0.3%、蛋白胨0.2%、CaCl₂ 0.2%、MgSO₄·7H₂O 0.1%、K₂HPO₄·3H₂O0.3%、KH₂PO₄ 0.15%和FeSO₄·7H₂O 0.003%，余量为水，以上%皆为质量体积比；所述发酵培养基在pH7.0~7.5、0.1Mpa、121℃条件下，连同发酵罐一起灭菌60min，自然冷却到常温；

培养条件为：在28~30℃条件下，通气保压0.05~0.1MPa，溶氧量28%~30%，转速180~200r/min，发酵过程中保持发酵液pH7.2~7.5，培养48h后检测活菌总量，产孢率达到92%，活菌计数浓度不低于1.1×10¹⁰cfu/mL，发酵结束。

7.一种如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）的表面活性剂为有机硅BD-3077，防腐剂为苯甲酸钠，悬浮助剂为聚羧酸钠，增稠剂为黄原胶。

8.一种如权利要求1生防细菌BTh05和/或如权利要求2~4任一项所述的菌剂在防治畸雌腐霉菌和/或瓜果腐霉菌引起的瓜果猝倒病中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述瓜果猝倒病包括茄科植物和/或葫芦科植物猝倒病。

10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用为采用含有上述生防细菌BTh05的菌剂或菌剂的稀释液浸种、灌根和/或喷施茎部。