[发明专利]一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和应用

说明书

本发明涉及微生物植物保护应用技术领域，具体涉及一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和在瓜果猝倒病防治中的应用，生防细菌BTh05已在CGMCC保藏，保藏编号为CGMCC NO.20906，保藏日期为2020年10月19日，分类命名为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis，所述菌剂的制备方法包括获得用于发酵的种子液、发酵和加入添加剂。本发明生防细菌BTh05及其菌剂对茄科植物和葫芦科植物的猝倒病具有明显生物防治作用，尤其能有效对辣椒、番茄和黄瓜种子进行消毒，防治瓜果猝倒病病原菌的繁殖，节约大量成本，使瓜果生产效益最大化，对瓜果菜的栽培具有重大应用价值。

技术领域

本发明涉及微生物植物保护应用技术领域，具体涉及一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和应用。

背景技术

猝倒病的爆发严重影响了瓜果蔬菜的产量和品质，制约了农业经济的发展。目前化学农药和化学肥料是防治瓜果猝倒病和提高农作物产量的主要手段，但长期使用化学农药和化学肥料带来的农药残留和环境污染等诸多问题让人们对食品安全感到十分忧虑。随着人们对无污染、无公害绿色食品的日益关注，生物防治手段替代化学防治手段逐渐得到了广大群众的认可。

自然界中存在着许多对植物健康生长有益的微生物，这些有益微生物有的能够促进植物生长，通常被称作植物促生菌株；有的能够防治植物病害，通常被称作植物病害生防菌。植物生防菌通常通过定殖在植物根围，提高植物对周围生物的压力。其中，假单胞菌和芽孢杆菌是两个重要的生防细菌类群，它们在农作物根茎病害的防治上发挥着重要的作用。尤其，芽孢杆菌属能够产生抗逆芽孢，广泛分布于大自然界中，并且具有生物多样性，是植物生长环境中重要的微生物种群。芽孢杆菌的特性使得其成为理想的生防制剂候选者，在促进植物健康和生长方面起着重要的作用。

为解决化学农药施用带来的环境污染、人畜安全等问题，同时利于可持续农业的发展，提供一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和应用十分重要，为生物农药的开发利用打下基础。

发明内容

针对化学农药施用带来的环境污染、人畜安全问题，本发明提供一种瓜果猝倒病生防细菌BTh05及其菌剂、菌剂制备方法和应用，本发明生防细菌BTh05及其菌剂对茄科植物和葫芦科植物的猝倒病具有明显生物防治作用，尤其能够有效对辣椒、番茄和黄瓜种子进行消毒，防治瓜果猝倒病病原菌的繁殖，从而节约大量成本，使瓜果生产效益最大化，对瓜果菜的栽培具有重大应用价值。

第一方面，本发明提供一种生防细菌BTh05，所述生防细菌BTh05已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.20906，保藏日期为2020年10月19日，分类命名为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis。

第二方面，本发明提供一种含有上述生防细菌BTh05的菌剂。

进一步的，所述菌剂的剂型为悬浮剂。

进一步的，所述菌剂的活菌浓度不低于1.0×10¹⁰cfu/mL，室温条件下半年后菌剂中活菌数目不低于8.0×10⁹cfu/mL。

第三方面，本发明提供一种上述菌剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将-80℃保存的生防细菌BTh05菌株接种至固体LB培养基进行活化，在30℃±1℃条件下倒置培养16h或过夜培养，挑取单菌落并接种于液体LB培养基，30℃±1℃条件下震荡培养至对数期，获得用于发酵的种子液，作为种子液浓度不低于1.0×10⁸cfu/mL；

(2)室温条件下，将种子液以体积比1:10的接种量接种至发酵培养基，保证发酵培养体系中生防细菌BTh05菌体初始浓度不低于1.0×10⁷cfu/mL；