[发明专利]一种检测1,5-AG的试剂盒和检测方法

权利要求书

1.一种检测1,5-AG的试剂盒，其特征在于，包括第一试剂和第二试剂：

其中，所述第一试剂包括葡萄糖变构酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、胆红素氧化酶、4-AAP、表面活性剂、pH缓冲液、防腐剂以及稳定剂；

所述第二试剂包括吡喃糖氧化酶、TOOS、pH缓冲液、防腐剂和稳定剂；

所述pH缓冲液控制所述第一试剂和第二试剂的pH为5.00-9.00。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中各组分的含量为：葡萄糖变构酶1-100KU/L、葡萄糖氧化酶1-100KU/L、过氧化物酶1-100KU/L、抗坏血酸氧化酶1-10008KU/L、胆红素氧化酶1-100KU/L、表面活性剂0.05-200g/L、pH缓冲液5-500mmol/L、稳定剂0.05-200g/L、防腐剂0.05-10g/L；所述第二试剂中各组分的含量为：吡喃糖氧化酶1-100KU/L、TOOS0.05-200g/L、表面活性剂0.05-200g/L、pH缓冲液5-500mmol/L、稳定剂0.05-200g/L、防腐剂0.05-10g/L。

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为曲拉通类、吐温类、布里杰类中的一种或多种。

4.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述pH缓冲液为MES、MOPS、MOPSO、PIPES、HEPES、TES、ADA、Tris、Bis-Tris、磷酸、柠檬酸、醋酸、碳酸、硼酸中的一种或多种，所述pH缓冲液的浓度为5-500mmol/L。

5.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠、PC300、山梨酸钾、新霉素、庆大霉素中的一种或多种。

6.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为聚乙二醇类、多羟基醇类、金属离子络合剂中的一种或多种。

7.一种使用权利要求1-6任一项所述试剂盒的检测方法，其特征在于，包括如下检测步骤：

配制样品空白、样品、标准空白以及标准品，分别加入第一试剂，在30-37℃下反应，反应结束后，加入第二试剂，待反应结束后，测定相应的吸光度，计算得到样品中1,5-AG的浓度。

8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，根据式1计算所述样品中1,5-AG的浓度：

其中，A_样品表示样品的吸光度、A_样品空白表示样品空白的吸光度、A_{标准品表示}标准品的吸光度、A_标准空白表示标准空白的吸光度。

9.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，测定吸光度时，波长为340-800nm。

10.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述样品空白、样品、标准空白以及标准品的体积为1.5-50μL，所述第一试剂的体积为20-300μL，所述第二试剂的体积为20-300μL。