[发明专利]用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法在审
申请号: | 202011366626.6 | 申请日: | 2015-12-15 |
公开(公告)号: | CN112626153A | 公开(公告)日: | 2021-04-09 |
发明(设计)人: | P.李;C.王;C.舒 | 申请(专利权)人: | 立博美华基因科技有限责任公司 |
主分类号: | C12P19/36 | 分类号: | C12P19/36;A61K31/7084;A61K31/7076;A61P35/00;A61P35/02;C07H19/213;C07H1/06 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 刘蕾 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | cgamp cgasmp 治疗 癌症 方法 | ||
1.酶促合成cGAMP或cGAsMP的方法,包括:
a.提供重组cGAS;和
b.将cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯、GTP和dsDNA结合以合成cGAMP或cGAsMP。
2.用于酶促合成和纯化cGAMP或cGAsMP的方法,包括:
a.提供重组cGAS;
b.将cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯、GTP和dsDNA结合以合成cGAMP;
c.通过超滤将cGAMP或cGAsMP与dsDNA和cGAS分离;
d.使用离子交换色谱法和任选的凝胶过滤色谱法纯化cGAMP或cGAsMP;和
e.通过冻干法从cGAMP或cGAsMP中除去盐。
3.根据权利要求2所述的方法,其中cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯和GTP在减少特异性相互作用的成分的存在下结合。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述减少非特异性相互作用的成分是鲑鱼精子DNA。
5.根据权利要求2所述的方法,其中cGAS与ATP和GTP在至少一种缓冲剂、盐和/或抗氧化剂的存在下结合。
6.根据权利要求5所述的方法,其中至少一种缓冲剂是HEPES缓冲剂。
7.根据权利要求5所述的方法,其中至少一种盐是MgCl2和/或NaCl。
8.根据权利要求2所述的方法,其中至少一种抗氧化剂是β-巯基乙醇。
9.根据权利要求2所述的方法,其中通过在4000x g下离心15分钟除去沉淀物。
10.根据权利要求2所述的方法,其中所述超滤通过具有10kD孔径的超滤过滤器进行。
11.根据权利要求2所述的方法,其中所述离子交换色谱法在Q Sepharose柱上进行。
12.根据权利要求11所述的方法,其中所述Q Sepharose柱用含乙酸铵的挥发性盐缓冲剂洗脱。
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