[发明专利]用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法在审

专利信息
申请号: 202011366626.6 申请日: 2015-12-15
公开(公告)号: CN112626153A 公开(公告)日: 2021-04-09
发明(设计)人: P.李;C.王;C.舒 申请(专利权)人: 立博美华基因科技有限责任公司
主分类号: C12P19/36 分类号: C12P19/36;A61K31/7084;A61K31/7076;A61P35/00;A61P35/02;C07H19/213;C07H1/06
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 刘蕾
地址: 美国新*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: cgamp cgasmp 治疗 癌症 方法
【权利要求书】:

1.酶促合成cGAMP或cGAsMP的方法,包括:

a.提供重组cGAS;和

b.将cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯、GTP和dsDNA结合以合成cGAMP或cGAsMP。

2.用于酶促合成和纯化cGAMP或cGAsMP的方法,包括:

a.提供重组cGAS;

b.将cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯、GTP和dsDNA结合以合成cGAMP;

c.通过超滤将cGAMP或cGAsMP与dsDNA和cGAS分离;

d.使用离子交换色谱法和任选的凝胶过滤色谱法纯化cGAMP或cGAsMP;和

e.通过冻干法从cGAMP或cGAsMP中除去盐。

3.根据权利要求2所述的方法,其中cGAS与ATP或ATP硫代磷酸酯和GTP在减少特异性相互作用的成分的存在下结合。

4.根据权利要求3所述的方法,其中所述减少非特异性相互作用的成分是鲑鱼精子DNA。

5.根据权利要求2所述的方法,其中cGAS与ATP和GTP在至少一种缓冲剂、盐和/或抗氧化剂的存在下结合。

6.根据权利要求5所述的方法,其中至少一种缓冲剂是HEPES缓冲剂。

7.根据权利要求5所述的方法,其中至少一种盐是MgCl2和/或NaCl。

8.根据权利要求2所述的方法,其中至少一种抗氧化剂是β-巯基乙醇。

9.根据权利要求2所述的方法,其中通过在4000x g下离心15分钟除去沉淀物。

10.根据权利要求2所述的方法,其中所述超滤通过具有10kD孔径的超滤过滤器进行。

11.根据权利要求2所述的方法,其中所述离子交换色谱法在Q Sepharose柱上进行。

12.根据权利要求11所述的方法,其中所述Q Sepharose柱用含乙酸铵的挥发性盐缓冲剂洗脱。

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