[发明专利]用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法

说明书

在一个实施方式中，治疗患者癌症的方法包括向患有癌症的患者施用cGAMP或cGAsMP并允许cGAMP或cGAsMP治疗癌症。在另一个实施方式中，用于酶促合成和纯化cGAMP或cGAsMP的方法包括：提供cGAS；将cGAS分别与ATP或ATP硫代磷酸酯结合，并与GTP结合产生cGAMP或cGAsMP；通过超滤将cGAMP或cGAsMP与cGAS和DNA分离；并使用离子交换色谱法和任选的凝胶过滤色谱法纯化cGAMP或cGAsMP。

本申请是申请日为2015年12月15日、申请号为201580069410.4、发明名称为“用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法”的专利申请的分案申请。

技术领域

用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法。

背景技术

已发现cGAS-cGAMP-STING途径是对哺乳动物细胞的细胞质中DNA的存在的细胞先天免疫应答的一部分。已鉴定了许多细胞质DNA或RNA的先天传感器(innate sensors)。参见Barber GN，STING-dependent cytosolic DNA sensing pathways，Trends inimmunology 35：88-93(2014)。长期以来，认为细胞溶质中的微生物DNA通过刺激I型干扰素的表达来诱导有力的先天免疫应答。参见Stetson DB，et a1.，Recognition of cytosolicDNA activating an IRF3-dependent innate immune response，Immunity 24：93-103(2006)。搜索细胞溶质DNA传感器首先导致发现STING(也称为MITA、ERIS、MPYS和TMEM173)，其是位于ER膜上的衔接蛋白并介导发送至细胞溶质DNA和细菌环状二核苷酸(诸如c-di-GMP和c-di-AMP)的信号。图1；另见Ishikawa H.et al.，STING is an endoplasmicreticulum adaptor that facilitates innate immune signalling，Nature 455：674-8(2008)。尽管STING用作环状二核苷酸的直接传感器，但它不是细胞溶质DNA的直接传感器，并且对dsDNA的亲和性非常低。参见Wu J.et al.，Innate immune sensing and signalingof cytosolic nucleic acids，Annual review ofimmunology 32：461-88(2014)。在搜索细胞溶质DNA传感器时，Sun等人鉴定了作为STING上游的细胞溶质dsDNA传感器的酶环状GMP-AMP合酶(cGAS)。Sun L，et al.，Cyclic GMP-AMP synthase is a cytosolic DNAsensor that activates the type I interferon pathway，Science 339：786-91(2013)。cGAS被dsDNA活化并催化来自ATP和GTP的非经典环状二核苷酸2′，5′cGAMP(以下称为cGAMP)的合成。参见Zhang X，et al.，Cyclic GMP-AMP Containing MixedPhosphodiester Linkages Is An Endogenous High-Affinity Ligand for STING，Molecular cell 51：226-35(2013)；并见图1。

cGAMP用作内源性第二信使，其经由STING刺激I型干扰素的诱导。通过STING的cGAMP结合导致蛋白激酶TBK1和转录因子IRF3到信号复合物的募集。参见图1；并见TanakaY，et al.，STING Specifies IRF3 Phosphorylation by TBK1 in the Cytosolic DNASignaling Pathway，Science signaling 5：ra20(2012)。

信号传导复合物上通过TBK1的IRF3磷酸化促进了IRF3的低聚及其向细胞核的移位，在那里其与转录因子NF-κB共同激活IFN-β基因的转录。参见Tanaka；并见图1。