[发明专利]一种葡萄糖的快速检测方法、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种葡萄糖的快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将若干个不同浓度的葡萄糖标准水溶液与葡萄糖氧化酶水溶液混合，在37～42℃水浴中反应一定时间(Ⅰ)后，加入硫酸水溶液，混匀，再加入2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液，在沸水浴中反应一定时间(Ⅱ)后，得到已知葡萄糖标准溶液的反应产物；观察已知葡萄糖标准溶液的反应产物的颜色变化并测定吸光度值，绘制葡萄糖含量标准曲线图；

(2)将待测溶液与葡萄糖氧化酶水溶液混合，在37～42℃水浴中反应一定时间(Ⅰ)后，加入硫酸水溶液，混匀，再加入2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液，在沸水浴中反应一定时间(Ⅱ)后，得到待测溶液反应产物；观察待测溶液反应产物的颜色变化并测定吸光度值；

(3)根据步骤(1)的葡萄糖含量标准曲线和步骤(2)检测得到的待测溶液反应产物的吸光度值即可计算出待测溶液中葡萄糖的浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的葡萄糖标准水溶液的浓度为0.01～2000μM；

步骤(1)中，所述的葡萄糖氧化酶水溶液的浓度为1μg/mL～50mg/mL；

步骤(1)中，所述的水浴的温度为38～40℃；

步骤(1)中，所述的反应一定时间(Ⅰ)为1～10min。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述的硫酸水溶液，以氢离子的含量计算浓度，为1μM～30M；

步骤(1)中，所述的2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液中2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的浓度为0.1～200mM。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述的葡萄糖标准水溶液、葡萄糖氧化酶水溶液、硫酸水溶液、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液按体积比10～80:10～80:800～950:10～50计算；

步骤(1)中，所述的反应一定时间(Ⅱ)为10～300s；

步骤(1)中，所述的测定吸光度值所用的波长为400～450nm。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的待测溶液为含有葡萄糖的液体；包括但不限于果汁、尿液和血液中的至少一种。

步骤(2)中，所述的葡萄糖氧化酶水溶液的浓度为1μg/mL～50mg/mL；

步骤(2)中，所述的水浴的温度为38～40℃；

步骤(2)中，所述的反应一定时间(Ⅰ)为1～10min。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，

步骤(2)中，所述的硫酸水溶液，以氢离子的含量计算浓度，为1μM～30M；

步骤(2)中，所述的2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液中2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的浓度为0.1～200mM；

步骤(2)中，所述的待测溶液、葡萄糖氧化酶水溶液、硫酸水溶液、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液按体积比10～80:10～80:800～950:10～50计算。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，

步骤(2)中，所述的反应一定时间(Ⅱ)为10～300s；

步骤(2)中葡萄糖氧化酶水溶液、硫酸水溶液、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐水溶液的用量及浓度与步骤(1)中的保持一致；

步骤(2)中，所述的测定吸光度值所用的波长为400～450nm。

8.一种葡萄糖的快速检测试剂盒，其特征在于，基于权利要求1～7任一所述的检测方法设计得到，包括如下成分：葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶水溶液、ABTS显色剂检测液、硫酸检测液。