[发明专利]一种葡萄糖的快速检测方法、试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种葡萄糖的快速检测方法、试剂盒及其应用，属于检测技术领域。所述的葡萄糖的快速检测方法，包括如下步骤：(1)绘制葡萄糖含量标准曲线；(2)观察待测溶液反应产物的颜色变化并测定其吸光度值；(3)根据葡萄糖含量标准曲线和待测溶液反应产物的吸光度值计算待测溶液中葡萄糖的浓度。本发明提供的方法简单、便宜、快速、且灵敏，可以用于葡萄糖的现场快速检测。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，特别涉及一种葡萄糖的快速检测方法、试剂盒及其应用。

背景技术

葡萄糖是一类单糖，其作用和功效有很多。一、人体能量来源，由于可以直接进入人体被吸收；二、为人体提供热量，对低血糖、高血压、水肿等症状有积极改善作用；三、利尿、解毒的功效，对中暑、昏迷患者的部分功能具有重要作用。因此，葡萄糖在生物学领域具有重要地位，在医疗、食品行业具有广泛应用。

常见的检测葡萄糖的方法主要包括高效液相色谱法、酶-电极法、酶-比色法等。这些方法的灵敏度和特异性都很好，但是需要昂贵的仪器或耗材，具有耗时长、操作复杂等缺点，很难满足现场快速检测葡萄糖的需求。因此，研究一种简单、便宜、现场快速检测葡萄糖的方法及试剂盒具有重要的意义。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种葡萄糖的快速检测方法。

本发明的另一目的在于提供一种葡萄糖的快速检测试剂盒。

本发明的再一目的在于提供上述葡萄糖的快速检测方法、试剂盒的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种葡萄糖的快速检测方法，包括如下步骤：

(1)将若干个不同浓度的葡萄糖标准水溶液与葡萄糖氧化酶水溶液混合，在37～42℃水浴中反应一定时间(Ⅰ)后，加入硫酸水溶液，混匀，再加入2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)水溶液，在沸水浴中反应一定时间(Ⅱ)后，得到已知葡萄糖标准溶液的反应产物；观察已知葡萄糖标准溶液的反应产物的颜色变化并测定吸光度值，绘制葡萄糖含量标准曲线图；

(2)将待测溶液与葡萄糖氧化酶水溶液混合，在37～42℃水浴中反应一定时间(Ⅰ)后，加入硫酸水溶液，混匀，再加入2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)水溶液，在沸水浴中反应一定时间(Ⅱ)后，得到待测溶液反应产物；观察待测溶液反应产物的颜色变化并测定吸光度值；

(3)根据步骤(1)的葡萄糖含量标准曲线和步骤(2)检测得到的待测溶液反应产物的吸光度值即可计算出待测溶液中葡萄糖的浓度。

步骤(1)中，所述的葡萄糖标准水溶液的浓度优选为0.01～2000μM；更优选为0.01μM、0.2μM、0.1μM、0.5μM、1μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM、60μM、70μM、80μM、90μM、100μM、200μM、300μM、400μM、500μM、600μM、700μM、800μM、900μM、1000μM和2000μM中的至少两种。

步骤(1)中，所述的葡萄糖氧化酶水溶液的浓度优选为1μg/mL～50mg/mL；更优选为1～50mg/mL；进一步优选为1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL或10mg/mL。

步骤(1)中，所述的水浴的温度优选为38～40℃。

步骤(1)中，所述的反应一定时间(Ⅰ)优选为1～10min；更优选为5～10min。

步骤(1)中，所述的硫酸水溶液，以氢离子的含量计算浓度，优选为1μM～30M；更优选为0.001～10M；进一步优选10M、5M、1M、0.5M、0.1M、0.05M、0.01M、0.005M或0.001M。