[发明专利]一种利用荧光增强法检测谷胱甘肽的方法

说明书

本发明涉及一种利用荧光增强法检测谷胱甘肽的方法，步骤如下：⑴将荧光材料和谷胱甘肽置于水中，混合均匀；⑵将表面活性剂、阳离子和阴离子加入到上述混合溶液中，构成荧光检测谷胱甘肽的体系；⑶将上述配制好的荧光检测体系混合均匀后，置于20‑40℃的环境中待测；⑷采用980nm激发照射荧光检测体系，记录550nm处荧光强度F数值，即得。本方法利用上转换纳米材料在近红外光激发下能发射出可见光的特性，且在含有表面活性剂、阳离子和阴离子的体系可增强上转换纳米材料的荧光，据此高灵敏传感检测体系中谷胱甘肽，且该方法选择性高，稳定性好。

技术领域

本发明属于小分子生物硫醇化合物检测技术领域，尤其是一种利用荧光增强法检测谷胱甘肽的方法。

背景技术

谷胱甘肽是哺乳动物和真核细胞生物活细胞中最主要的非蛋白质硫醇化合物，是一种重要的内源性抗氧化剂、解毒剂，在清除生物体系中自由基方面发挥重要作用。谷胱甘肽是防御有毒物质的第一道防线，可广泛参与人体免疫调节、新陈代谢、能量运输和其他生理过程。它在维持细胞氧化还原稳态、细胞信号转导、解毒等方面发挥着关键作用。通常，人体中谷胱甘肽浓度的不平衡会导致许多疾病，例如白细胞缺失、牛皮癣、肝损伤、癌症、人类免疫缺陷病毒(HIV)、阿尔茨海默病、糖尿病、帕金森病、心血管疾病和炎症。除了这些作用之外，谷胱甘肽还被用作成瘾成分并添加到食品和天然化妆品中。

到目前为止，已经开发出了许多定量检测谷胱甘肽的方法，如比色法、电化学法、酶法、高效液相色谱法、质谱法、电致化学发光法、表面增强拉曼散射、光电化学方法、酶联免疫吸附测定、毛细管电泳法、伏安法和荧光光谱法。荧光光谱法具有灵敏度高、灵活性好、操作简单以及非破坏性检测等优点，近年来，荧光光谱法成为了一种有前景的谷胱甘肽检测方法。

迄今为止，研究人员已经设计了许多有机荧光团，基于不同的传感机理(环化、迈克尔加成、二硫化物和磺酰胺裂解、巯基亲核取代和金属络合物错位配位等)来检测谷胱甘肽。尽管这些有机荧光材料很实用，但它们中的大多数仍然存在成本高、耗时、样品纯化步骤复杂等局限；在生物应用方面还存在光漂白、稳定性差、生物相容性差等缺点。因此，非常需要开发具有理想生物和环境安全性、高荧光强度和低成本的新型荧光纳米材料；建立一种高灵敏度、高选择性、低成本和操作简单的谷胱甘肽新检测方法具有重要意义。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明目的在于现有技术中的不足之处，提供一种利用荧光增强法检测谷胱甘肽的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种利用荧光增强法检测谷胱甘肽的方法，步骤如下：

⑴将荧光材料和谷胱甘肽置于水中，混合均匀，荧光材料的终浓度为0.001-0.1mg·mL^-1，谷胱甘肽的终浓度为6.0×10^-10-1.0×10^-3mg·mL^-1；

⑵将表面活性剂、阳离子和阴离子加入到上述混合溶液中，构成荧光检测谷胱甘肽的体系；其中，表面活性剂的质量终浓度为0.01％-0.1％，阳离子的浓度为10μg·mL^-1-150μg·mL^-1，阴离子浓度为2.3×10^-10mol·L^-1-2.5×10^-1mol·L^-1；

⑶将上述配制好的荧光检测体系混合均匀后，置于20-40℃的环境中待测；

⑷采用980nm激发照射荧光检测体系，记录550nm处荧光强度F数值，即得。

而且，所述步骤⑴中荧光材料为以乙酸钇四水合物为主体发光基质，乙酸镱(III)四水合物为敏化剂，醋酸铒(III)水合物为激活剂，油酸为配体和溶剂，以及1-十八烯为高沸点溶剂，通过溶剂热法制备得到的上转换荧光纳米材料。