[发明专利]一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，其特征在于：包括以下重量份的组分：离心菌体45～55份、助剂35～40份、离心菌体上清液10～15份；其中,所述离心菌体中的菌体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38，保藏号为CGMCC No.20143。

2.根据权利要求1所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，其特征在于：所述的助剂包括以下重量份的组分：润湿分散剂17～20份、增稠剂3～5份、非离子表面活性剂12～15份。

3.根据权利要求1所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，其特征在于：所述的润湿分散剂以下重量份的组分：羧甲基纤维素钠(EMA)10份、萘磺酸盐(D425)5份、吐温(20)4.8份中的任一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求1所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，其特征在于：所述的非离子表面活性剂包括以下重量份的组分：三苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯8份、烷基酚聚氧乙烯醚(OP-10)4份、聚乙二醇(PEG600)2.2份中的任一种或两种以上的组合。

5.一种权利要求1～4任一项所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，包括菌体制备、菌液制备和菌液成品步骤，其特征在于：具体步骤为

1)菌体制备，取菌种经LB培养基活化、发酵料培养基发酵、离心分离得到离心菌体；

2)菌液制备，取步骤1)制得的离心菌体、助剂、离心菌体上清液混合搅拌均匀得到菌液；

3)菌液成品，取步骤2)制得的菌液加入稀释剂稀释得到枯草芽孢杆菌菌悬液成品，即为防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂。

6.根据权利要求5所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，其特征在于：所述的步骤1)中的菌种活化方式为将-80℃下保存的枯草芽孢杆菌菌株在LB固体培养基上活化12～16h，得活化的菌株。

7.根据权利要求5所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，其特征在于：所述的步骤1)中的发酵方式为取活化的菌株接种LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液；再把种子液与培养液以体积比为1：120的比例接入到发酵料培养基中，在温度为36.5℃～37.5℃条件下，转速为120rpm/min条件下培养25～30h，得菌料发酵液。

8.根据权利要求5所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，其特征在于：所述步骤1)中

当所述LB培养基为LB液体培养基时，pH＝6.8～7.5，包括以下重量份的组分：细菌学蛋白胨1份、酵母提取粉0.5份、氯化钠1份、水95份；

当所述LB培养基为LB固体培养基时，pH＝6.8～7.5，包括以下重量份的组分：细菌学蛋白胨1份、酵母提取粉0.5份、氯化钠1份、琼脂粉24份、水73.5份。

9.根据权利要求5所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，其特征在于：所述步骤1)中发酵液培养基包括以下重量份的组分：黄豆粉1.0～1.6份、蔗糖0.1～0.5份、蛋白胨0.2～0.6份、玉米粉0.2～0.6份、碳酸钙0.3～0.9份、鱼粉0.1～0.3份、硫酸铵0.01～0.08份、硫酸镁0.02～0.05份、磷酸二氢钾0.01～0.04份、磷酸氢二钾0.02～0.05份、硫酸锰0.01～0.04份、氢氧化钠0.01～0.04份、氯化钠0.02～0.03份、消泡剂0.5～1.5份，用盐酸及氢氧化钠调节pH至6.8～7.5。

10.根据权利要求5所述的具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂制备方法，其特征在于：所述的步骤3)制得的枯草芽孢杆菌菌悬液成品，即防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂中的有效活菌数不小于2.0×10⁸cfu/mL。