[发明专利]一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，包括离心菌体、助剂和离心菌体上清液。一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂的制备方法，包括菌体制备、菌液制备和菌液成品步骤。本发明提供的微生物菌剂有较强的选择性，本申请中的功能菌种枯草芽孢杆菌WSWFJ38具有对人畜等靶标以外生物(非靶标生物)安全无害的特点，甚至对天敌昆虫也是安全的，是由自然界中筛选分离得到，未进行基因改造，田间使用不具有风险，可在土壤中自然快速分解，对作物、动物和人体均不产生危害，可实现田间、作物、水源无污染、无残留，与常规杀虫农药相比安全性大大提高，有利于有机农业的发展。

技术领域

本发明属于害虫防治技术领域，尤其涉及一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith),又称秋黏虫,属鳞翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae灰翅夜蛾属Spodoptera,是一种原产于美洲热带和亚热带地区的杂食性害虫。我国于2019年1月11日前次于云南江城县发现该虫的为害，且能在我国多数省、市、自治区为害。草地贪夜蛾不仅取食为害玉米，还可取食大麦、水稻、花生、甜菜、大豆、烟草、番茄、马铃薯、白菜、小麦等80余农作物种植物。

草地贪夜蛾生命周期包括卵、幼虫、蛹和成虫4个虫态，取食为害阶段为幼虫期，以6龄幼虫为害最为严重，低龄幼虫(1～3龄)取食玉米叶片形成半透明薄膜“窗孔”，高龄幼虫(4～6龄)取食形成不规则的长形孔洞，高龄幼虫也会取食玉米雄穗和果穗。由于化学药剂和物理防控对于病害的防治效果较差，基于生物产业的快速发展，采用农用微生物菌剂进行枯萎病的防控，既能避免农作物产生抗药性，又能实现绿色环保无残留，所以研制一株高效防草地贪夜蛾的功能菌剂及其制成的防控产品对于农业的健康持续发展尤为重要。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂；第二目的在于提供一种具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂的制备方法。

本发明的第一目的是这样实现的：具有防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂，包括以下重量份的组分：离心菌体45～55份、助剂35～40份、离心菌体上清液10～15份；其中,所述离心菌体中的菌体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38，保藏号为CGMCCNo.20143。

所述微生物菌株已于2020年06月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌株名称为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38，保藏号为CGMCC No.20143。

本发明的第二目的是这样实现的：包括菌体制备、菌液制备和菌液成品步骤，具体为

1)菌体制备，先取-80℃下保存的保藏号为CGMCC No.20143的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38菌株在LB固体培养基上活化12～16h活化的得菌株；其次，取菌株置于LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm/min条件下培养24h活化得种子液；随后取种子液置于发酵料培养中，中温度为36.5℃～37.5℃条件下，转速为120rpm/min条件下培养25～30h得发酵液；最后以离心机转速6000rpm/min条件下离心15min得到离心菌体；

2)菌液制备，取步骤1)制得的离心菌体、离心菌体上清液，以及由润湿分散剂、醇类抗冻剂、增稠剂和非离子表面活性剂组成的助剂混合搅拌均匀得到菌液，三者的重量百分比为：离心菌体45～55份、离心菌体上清液10～15份、助剂35～40份；

3)菌液成品，取步骤2)制得的菌液加入稀释剂稀释得枯草芽孢杆菌菌悬液成品，即为防治草地贪夜蛾功能的微生物菌剂。