[发明专利]一种snhg17-KO基因敲除小鼠模型的构建方法和应用

说明书

本发明公开了一种snhg17‑KO基因敲除小鼠模型的构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。该gRNA分子的靶点序列选自snhg17基因的外显子1～外显子6中的至少一个外显子，该gRNA能够用于有效切割敲除小鼠基因组中的snhg17基因，为snhg17在肿瘤中的作用机制的研究提供可靠的动物模型。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及一种snhg17-KO基因敲除小鼠模型的构建方法和应用。

背景技术

LncRNA(Long non-coding RNA，lnc RNA)是一类长度大于200个核苷酸，在细胞内不能翻译蛋白的RNA；大多数lncRNA本身能够被5‘端加帽、剪接及3‘端进行聚腺苷酸化而缺乏开放性阅读框，同时能够被RNA聚合酶II转录。LncRNA被认为是分子支架、结构性RNA或调节分子参与细胞的遗传、剪接、mRNA的稳定性以及调控小RNA(miRNA)的“分子海绵”。

小核RNA(Small nucleolar RNA，snRNA)是一类主要在细胞核内表达的小分子RNA，长度约为60-300个核苷酸。SnRNA宿主基因为lncRNA，在肿瘤中起到抑制或促进癌细胞存活的功能。

人类小核RNA宿主基因17(Small nucleolar RNA host gene 17，SNHG17)是一种重要的lncRNA，然而，其具体的分子机制尚不明确。

因此，深入研究SNHG17(snhg17)在肿瘤中的作用机制，开发新型靶点药物对临床肿瘤治疗提供一种探索性科学理论依据。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种snhg17-KO基因敲除小鼠模型的构建方法和应用。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供了一种gRNA分子，所述gRNA分子的靶点序列选自snhg17基因的外显子1～外显子6中的至少一个外显子。

优选地，所述gRNA分子包括：如SEQ ID No.1～4所示序列中的至少一条。

优选地，所述gRNA的靶点序列为外显子1～外显子3中的至少一个外显子。

优选地，所述gRNA包括如SEQ ID No.3～4所示的序列中的至少一条。

第二方面，本发明实施例提供了一种重组载体，其含有如前述任一实施方式所述的gRNA分子的碱基序列。

优选地，所述重组载体为表达载体。

优选地，所述重组载体上包含有Cas9蛋白的核酸序列。

第三方面，本发明实施例提供了如前述任一实施方式所述的重组载体在制备用于敲除snhg17基因的试剂中的应用。

第四方面，本发明实施例提供了一种用于敲除snhg17-KO基因的试剂盒，其包括如前述任一实施方式所述的gRNA分子或如前述任一实施方式所述的重组载体。

第五方面，本发明实施例提供了一种snhg17-KO基因敲除小鼠模型的构建方法，其包括：采用如前述任一实施方式所述的gRNA分子或如前述任一实施方式所述的重组载体，敲除小鼠基因组中的snhg17基因。

优选地，所述构建方法包括将所述gRNA分子或所述重组载体导入小鼠的受精卵中。

本发明具有以下有益效果：

本发明实施例提供了一种gRNA分子，所述gRNA分子的靶点序列选自snhg17基因的外显子1～外显子6中的至少一个外显子，该gRNA能够用于有效切割敲除小鼠基因组中的snhg17基因，为snhg17在肿瘤中的作用机制的研究提供可靠的动物模型。