[发明专利]副鸡禽杆菌HA融合蛋白及其三聚体、制备的疫苗组合物、制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种副鸡禽杆菌HA融合蛋白，该副鸡禽杆菌HA融合蛋白由从N端到C端依次排列的副鸡禽杆菌HA蛋白片段和促三聚体结构组成；该副鸡禽杆菌HA蛋白片段为A型、B型、或C型副鸡禽杆菌HA蛋白片段，该A型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.1所示，该B型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.2所示、该C型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.3所示。本发明的副鸡禽杆菌HA融合蛋白三聚化后形成的三聚体具有良好的免疫原性，其制备的疫苗不仅能产生完全保护，还能对低日龄的雏鸡完全保护，解决了现有技术中肉雏鸡早期的免疫问题。

技术领域

本发明涉及副鸡禽杆菌融合蛋白及其三聚体、制备的疫苗组合物、制备方法和应用，属于含有抗原或抗体的医药配制品领域。

背景技术

副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum，Apg)是一种引起鸡急性上呼吸道疾病的致病菌，有A、B、C三个血清型。该病首先发现于波兰和美国，发现后，确认在其他各国经常发生。1980年以来，我国也屡有本病的报道，目前3个血清型均为主要流行血清型。感染后的呼吸道疾病俗称鸡传染性鼻炎(Avian infectious coryza，IC)，临床上以面部水肿、鼻窦炎、流泪为主要特征，可引起产蛋鸡的产蛋量下降，育成鸡的生长受阻、开产期推迟，肉鸡增重率下降，给养禽业造成巨大的经济损失。Apg 3个血清型之间不具有交叉保护力，而且同血清型的不同分离菌株间的保护力也有较大差异。

副鸡禽杆菌引起的鸡传染性鼻炎是当前世界范围内严重危害家禽养殖业发展的重要疾病之一。在各种防控措施中，疫苗免疫仍为最重要的措施。目前养禽业中普遍使用全菌灭活疫苗，除对发酵培养的单位体积菌数有着较高的要求，还存在灭活不完全造成的生物安全方面的风险。

亚单位疫苗是近几年发展起来的一种比较切实可行的新型基因工程疫苗，副鸡禽杆菌亚单位疫苗研究尝试以HA蛋白为研究对象，然而因为分子量过大，很难在体外实现高效表达，未开发成产品，现有技术中至今未有副鸡禽杆菌亚单位疫苗上市。加上本病的发病特点是潜伏期短、传播迅速,短时间内便可波及全鸡群，因此，临床上急需开发出免疫效果好的亚单位疫苗组合物，能够有效防止该病的流行。

在当前产业上，全菌抗原疫苗制备过程中存在的内毒素及细菌碎片，造成的食欲下降、精神萎靡、注射部位肿块等副反应一直存在，尤其不能用于21日龄以下雏鸡，加之肉鸡出栏早，注射部位肿块不能完全吸收，因此全菌抗原疫苗不能施用于低日龄的肉雏鸡。如何解决肉雏鸡早期的副鸡禽杆菌免疫也是临床上亟需解决的问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种副鸡禽杆菌融合蛋白、其制备的疫苗组合物，该疫苗组合物能够有效预防和/或治疗副鸡禽杆菌的感染。

本发明提供一种副鸡禽杆菌HA融合蛋白，其中，所述副鸡禽杆菌HA融合蛋白由从N端到C端依次排列的副鸡禽杆菌HA蛋白片段和促三聚体结构组成；所述副鸡禽杆菌HA蛋白片段为A型副鸡禽杆菌HA蛋白片段、B型副鸡禽杆菌HA蛋白片段、或C型副鸡禽杆菌HA蛋白片段，所述A型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.1所示，所述B型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.2所示、所述C型副鸡禽杆菌HA蛋白片段如SEQ ID No.3所示。

本发明使用的副鸡禽杆菌HA蛋白片段具有良好的免疫原性，其制备成疫苗免疫鸡后较对应的副鸡禽杆菌HA蛋白制备的疫苗具有更好的免疫效果。