[发明专利]一种高密度液体酿酒酵母的制作方法

说明书

一种高密度液体酿酒酵母的制作方法，制作方法包括实验室扩培、液体酵母的工厂扩培、液体酵母的存储和运输；具体包括以下步骤：步骤一：从甘油培养基中选取生长良好的菌株进行种子培养，经过三次扩培后运送至生产车间；步骤二：对酵母转移罐出口和扩培罐入口进行消毒，在扩培罐培养后进行取样监测；步骤三：测定酵母密度和活性均合格后灌装在无菌容器中，密封观察鼓起情况，运输前将上清液换成无菌生理盐水，置于保温容器中冷链运输；本发明高密度液体酿酒酵母的制作方法生产效率高，生产周期短，产品高度浓缩，对后期出酒品质影响绩效，节能环保，获得的酵母活性超高，品质纯净，即投即用。

【技术领域】

本发明涉及生物科技领域，具体为一种高密度液体酿酒酵母的制作方法。

【背景技术】

近年来，精酿啤酒成为啤酒类消费的热点，精酿啤酒相较于传统工业啤酒，品种丰富且风味更佳；精酿啤酒酿造要求高，尤其对于酵母的选择更加严格，目前我国绝大多数精酿企业都在使用进口的干酵母粉，不仅品种少，出酒风味也远不及国外相应企业使用的液体酵母。少数品质要求较高的企业，花费巨资从国外购入液体酵母，但由于物流和存储条件的不确定性，往往效果不佳，而且由于液体酵母菌的种类丰富且对生产，储存和运输要求极高，制约了国内精酿啤酒的生产制造。

由此可见，提供一种高密度液体酿酒酵母的制作方法是本领域亟需解决的问题。

【发明内容】

针对上述问题，本发明高密度液体酿酒酵母的制作方法生产效率高，生产周期短，产品高度浓缩，对后期出酒品质影响绩效，节能环保，获得的酵母活性超高，品质纯净，即投即用，出酒风味纯净且正宗。

为解决上述问题，本发明提供一种高密度液体酿酒酵母的制作方法，制作方法包括实验室扩培、液体酵母的工厂扩培、液体酵母的存储和运输；具体包括以下步骤：

步骤一：从甘油培养基中选取生长良好的菌株进行种子培养，经过三次扩培后运送至生产车间；

步骤二：对酵母转移罐出口和扩培罐入口进行消毒，在扩培罐培养后进行取样监测；

步骤三：测定酵母密度和活性均合格后灌装在无菌容器中，密封观察鼓起情况，运输前将上清液换成无菌生理盐水，置于保温容器中冷链运输。

进一步的，所述步骤一中从-80℃10％甘油培养基中取出酵母菌株，用无菌接种环挑去少量菌液在酵母琼脂培养基上划线，22℃培养40-48小时，选取生长良好的菌落用于种子培养液。

进一步的，所述实验室扩培中第一次扩培取5-10个生长良好的菌落于15mL酵母液体培养基，22℃，200rpm摇床培养40-48小时。

进一步的，所述实验室扩培中，一次扩培后，当OD达到2-2.2 之间时进行二次扩培，将15mL培养物接种于200mL酵母液体培养基扩大培养，将培养烧瓶置于磁力搅拌器上，调节速度至200rpm。培养40-48小时。

进一步的，所述实验室扩培中二次扩培后，当OD达到2-2.2之间时进行三次扩培，将200mL培养物接种于5000mL酵母液体培养基扩大培养，将培养烧瓶置于磁力搅拌器上，调节速度至200rpm，培养40-48小时。

进一步的，所述步骤二中消毒过程包括酵母扩培罐中煮沸消毒酵母液体培养基，冷却至22℃；用酒精消毒酵母转移罐输出口和扩培罐酵母入口，用无菌软管连接酵母转移罐输出口和扩培罐酵母入口，用无菌气泵将酵母注入酵母扩培罐。

进一步的，所述扩培罐培养时搅拌器120rmp，并通入无菌空气，调节进气量为6L/min/200L培养基，压0.1mP。

进一步的，所述取样监测项目包括取样监测酵母数、pH值、糖度、肠道致病菌、金葡菌、乳酸菌，每8小时一次。