[发明专利]测定人体胃泌素G17含量的磁微粒化学发光检测试剂盒

说明书

本发明为测定人体胃泌素G17含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，试剂盒包括：磁分离试剂、R1试剂、R2试剂、校准品液系列和化学发光底物液；R2试剂为碱性磷酸酶标记的胃泌素G17单克隆抗体稀释液，化学发光底物液为碱性磷酸酶催化发光的底物液，R1试剂为样品稀释液，校准品液系列为含有不同浓度胃泌素G17抗原的稀释液；其特征在于，所述磁分离试剂为包被胃泌素G17单克隆抗体的免疫磁珠。本发明极大地提高了免疫反应的信号强度和灵敏度，使低含量物质在进行免疫结合时也能产生很强的化学发光信号，为胃泌素G17的检测提供了一种更准确、精确、方便、快捷和简单的方法。

技术领域

本发明涉及医用诊断试剂领域，特别是涉及一种采用磁微粒化学发光技术和抗原-抗体结合技术检测人体胃泌素G17含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。

背景技术

我国是全世界当之无愧的“胃病大国”，消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌是常见的胃类疾病，胃癌更是最常见的消化道肿瘤，为癌症相关死亡的主要原因。我国是胃癌高发国，约占世界胃癌数的1/2。相关文献报道，不同时期的胃癌经内镜微创治疗或外科手术治疗后五年生存率差异甚大。因此，早检出，早治疗是改善胃癌患者生存品质的重要渠道。

胃泌素是一种主要由胃窦和十二指肠的G细胞分泌的胃肠激素，对调节消化道功能和维持其结构完整有重要作用。目前发现的胃泌素分子，包括胃泌素原、甘氨酸延伸型胃泌素和酰胺化胃泌素等多种类型。其中，人体95％以上有生物活性的胃泌素是α-酰胺化胃泌素，主要含两种异构体G-17和G-34,其中80％～90％是6-17。

胃泌素17，是一个应用于临床医学的全新胃部指标，受到了国内外许多专家的关注。我国不仅将胃泌素17联合胃蛋白酶原辅助诊断胃黏膜疾病写入了“中国早期胃癌筛查及内镜诊治共识意见”，国家科技部、中国健康促进基金会更是将该项目列为了科研课题。日本、韩国、芬兰已将其列入了胃癌防治规划。

胃泌素17是由胃窦部及十二指肠近端黏膜的G细胞分泌的一种胃肠激素。人体中G-17的生理作用主要是刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，促进黏膜的生长及调节胃肠道功能，因此对于胃肠道正常功能的维持具有非常重要的作用。在不同的病理条件下，G-17水平会发生不同的变化。当发生胃黏膜萎缩后，由于胃窦腺体丧失导致胃窦G细胞数量减少，进入血液循环的G-17水平降低；胃体萎缩导致胃酸分泌降低，对胃窦G细胞的抑制作用减弱，血清G-17分泌增加。因此认为血清G-17是胃窦萎缩的血清学标志物。

磁微粒化学发光法是免疫分析技术的新发展，该技术将磁性微球应用于免疫检测的固相，大大提高了反应的表面积，增加了抗原或抗体的吸附量，加快了反应速度，提高了检测的灵敏度。相比于时间免疫分辨荧光、免疫层析及ELI SA方法，具有准确度高、特异性好、精密度高、线性范围广、试剂稳定性良好等特点；目前磁微粒化学发光免疫分析技术已成为在免疫诊断领域全球使用最广泛的分析方法，也是免疫试剂重要的发展方向之一。现有技术胃泌素17的检测方法主要有酶联免疫法、时间分辨荧光免疫分析法、化学发光法等，然而这些方法具有线性范围窄，检测时间长等缺点，无法满足临床需求。

因此，目前尚需一种污染小、灵敏度高、操作简单、自动化程度高、特异性好、成本低的胃泌素G17检测试剂盒和使用方法。

发明内容

本发明旨在开发一种灵敏度高、无污染、操作简单、特异性好并且成本低廉的一种测定人体胃泌素G17含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。

基于上述目的，本发明提供一种测定人体胃泌素G17含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：磁分离试剂、R1试剂、R2试剂、校准品液系列和化学发光底物液；磁分离试剂包括包被胃泌素G17单克隆抗体的免疫磁珠，R1试剂为样品稀释液，R2试剂为碱性磷酸酶标记的胃泌素G17单克隆抗体稀释液，校准品液系列为含有不同浓度胃泌素G17抗原的稀释液，化学发光底物液为碱性磷酸酶催化发光的底物液。

所述包被胃泌素G17单克隆抗体的免疫磁珠包被方法为：