[发明专利]一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法在审
| 申请号： | 202011391788.5 | 申请日： | 2020-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN112643043A | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 周宇;托尼·卡斯;丹尼尔·埃尔森;徐建华;周玄;杨光 | 申请（专利权）人： | 杭州苏铂科技有限公司;帝工（杭州）科技产业有限公司 |
| 主分类号： | B22F9/24 | 分类号： | B22F9/24;B22F1/00;G01N21/65;B82Y15/00;B82Y30/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 上海智晟知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 31313 | 代理人： | 张东梅 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市钱塘新*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 适配体 修饰 纳米 制备 方法 | ||
1.一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，包括：
制备各向异性金纳米星GNSt溶液；
将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星GNSt溶液中并涡旋；
加入柠檬酸盐-HCl缓冲液；
加入NaCl溶液并涡旋后静置一定时间；
将溶液离心后重新分散在超纯水中获得所需的核酸适配体修饰金纳米星溶液；以及
保存核酸适配体修饰金纳米星溶液备用。
2.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，制备各向异性金纳米星GNSt溶液进一步包括：
制备种子溶液；
将种子溶液添加到HAuCl4溶液中并添加HCl；
在搅拌的同时添加AgNO3溶液和抗坏血酸溶液；以及
将溶液离心后重新分散在超纯水中获得各向异性金纳米星GNSt溶液。
3.如权利要求2所述的制备各向异性金纳米星GNSt溶液，其特征在于：
在700rpm的搅拌下将1.5mL质量百分比为1％的柠檬酸盐溶液添加到10mL沸腾的0.001M HAuCl4中，15分钟后将溶液冷却制备获得种子溶液；
将2mL的种子溶液添加到200mL 2.5×10-4M HAuCl4溶液中，并添加200μL 1M的HCl；
在搅拌30秒的同时，添加400μL 0.01M的AgNO3溶液和1mL抗坏血酸溶液；以及
将溶液在4℃下以4000rpm的速度离心1.5h，然后重新分散在超纯水中获得各向异性金纳米星GNSt溶液。
4.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星GNSt溶液中是按照各向异性金纳米星GNSt和核酸适配体的摩尔比为1:900至1:1100的比例，将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星GNSt溶液中。
5.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星GNSt溶液中是按照各向异性金纳米星GNSt和核酸适配体的摩尔比为1:1000的比例，将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星GNSt溶液中。
6.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，柠檬酸盐-HCl缓冲液的pH＝3。
7.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，加入的NaCl溶液的浓度为0.3M/L-1M/L。
8.如权利要求1所述的核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，保存核酸适配体修饰金纳米星溶液是将制备获得的核酸适配体修饰金纳米星溶液保存在4℃的环境中。
9.一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，包括：
将核酸适配体按照GNSt和Aptamer的摩尔比为1：1000添加到0.6mL浓度为50nM/L的GNSt溶液中，并涡旋10秒；
加入0.6mL的20nM柠檬酸盐-HCl缓冲液；
加入0.5mL浓度为0.3M/L-1M/L的NaCl溶液，并涡旋10秒；
将混合物在4℃的冰箱中放置24小时；
将溶液在4℃下以4000rpm离心10分钟后重新分散在超纯水中；以及
将制备获得的核酸适配体修饰金纳米星溶液保存在4℃的冰箱中备用。
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