[发明专利]一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法

说明书

本发明公开了一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，包括：制备各向异性金纳米星(GNSt)溶液；将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星(GNSt)溶液中并涡旋；加入柠檬酸盐‑HCl缓冲液；加入NaCl溶液并涡旋后静置一定时间；将溶液离心后重新分散在超纯水中获得所需的核酸适配体修饰金纳米星溶液；以及保存核酸适配体修饰金纳米星溶液备用。

技术领域

本发明属于纳米生物材料技术领域，涉及一种简易核酸适配体修饰金纳米星的制备方法。

背景技术

拉曼光谱法用作分析方法可以获取分析物分子的指纹，但由于拉曼散射截面小、灵敏度低，限制了拉曼光谱法的使用场景。

表面增强拉曼散射(SERS)可以将拉曼信号显著放大几个数量级，从而可以提升拉曼检测的灵敏性。在现有技术中，采用贵金属纳米颗粒(NPs)作为表面增强拉曼光谱(SERS)的活性基底材料，当分析物分子位于纳米颗粒之间的连接处时，称为“热点”，这种情况下检测物的拉曼信号大大增强。但形成纳米颗粒之间的“热点”的工艺复杂且难度较高。

在各种生物相容性金纳米颗粒中，各向异性金纳米星(GNSt)具有表面上的多分支结构显示出独特的物理和光学特性，与其它金纳米颗粒相比具有更强的拉曼增强因子。此外，金纳米星不需要颗粒靠近产生“热点”，其自身的突出结构附近便可产生较多“热点”。

但是在检测时，由于检测物分子电性、大小、结构等因素，检测物很难接近并富集在金纳米星“热点”范围内，也就很难产生较强的拉曼信号。核酸适配体(Aptamer)是一种短的单链DNA或RNA寡核苷酸，可以折叠成一个独特的能够以高亲和力特异性结合靶标的二级结构，其作为主动转运药物或纳米颗粒的靶向配体，已经引起了极大的关注。因此，核酸适配体(Aptamer)为捕获固定检测物分子到金纳米星“热点”范围创造了可能。

为了克服现有的拉曼光谱法用作分析方法时拉曼散射截面小、灵敏度低，表面增强拉曼散射采用贵金属纳米颗粒形成“热点”的工艺复杂且难度较高，以及检测物很难接近并富集在金纳米星“热点”范围内导致很难产生较强的拉曼信号等问题，本发明提供一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，核酸适配体修饰的金纳米星可以特异性结合药物分子，并将目标分子拉近到金纳米星表面，富集在金纳米颗粒“热点”范围内，从而得到较强的表面增强拉曼散射信号，从而为环境水源中过量的药物污染物检测、人体内药物浓度的检测等提供了可能性。

发明内容

针对现有的拉曼光谱法用作分析方法时拉曼散射截面小、灵敏度低，表面增强拉曼散射采用贵金属纳米颗粒形成“热点”的工艺复杂且难度较高，以及检测物很难接近并富集在金纳米星“热点”范围内导致很难产生较强的拉曼信号等问题，本发明提供一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法。根据本发明的一个实施例，提供一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，包括：

制备各向异性金纳米星(GNSt)溶液；

将核酸适配体适体添加到各向异性金纳米星(GNSt)溶液中并涡旋；

加入柠檬酸盐-HCl缓冲液；

加入NaCl溶液并涡旋后静置一定时间；

将溶液离心后重新分散在超纯水中获得所需的核酸适配体修饰金纳米星溶液；以及

保存核酸适配体修饰金纳米星溶液备用。

在本发明的一个实施例中，制备各向异性金纳米星(GNSt)溶液进一步包括：

制备种子溶液；

将种子溶液添加到HAuCl₄溶液中并添加HCl；

在搅拌的同时添加AgNO₃溶液和抗坏血酸溶液；以及

将溶液离心后重新分散在超纯水中获得各向异性金纳米星(GNSt)溶液。