[发明专利]一种同时测定血浆中维生素A、维生素E和25-羟基维生素D的方法

权利要求书

1.一种同时测定血浆中多种脂溶性维生素的方法，其特征在于，采用液相色谱串联质谱法进行检测，检测的色谱条件如下：

色谱柱：F5色谱柱；

流动相：流动相A为含体积分数为0.1%甲酸和1mM甲酸铵的甲醇溶液；B为体积分数为0.1%的甲酸水溶液；

梯度洗脱程序为：0-2.7min，78%A；2.71-4.00min，97%A，4.01-4.8min，78% A。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述脂溶性维生素为维生素A、维生素E、25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3和/或3-epi-25-羟基维生素D3。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的规格为：长度50mm，内径3mm，填料粒径2.6μm；优选的色谱柱型号为Phenomenex Kinetex F5色谱柱。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

质谱条件为：离子源：ESI；雾化气流量：3L/min；加热气流量：5L/min；

接口温度：350℃；DL温度：150℃；加热块温度：450℃；

干燥气流量：15L/min。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：操作步骤如下：

a.供试品溶液制备：取待检血浆，加入乙醇、正己烷，萃取后离心，取上清液，氮气吹干，加入70%甲醇复溶，备用；

b.标准品溶液制备：取各维生素标准品，乙醇溶解，混合，稀释，备用；

c.分别将供试品溶液、标准品溶液进行液相色谱串联质谱法检测；

d.根据检测结果计算得到各自脂溶性维生素成分含量。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

步骤a中，乙醇溶解时，加入内标溶液；待检血浆与乙醇的体积比为1:3。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

步骤a中，待检血浆与正己烷的体积比为1:140。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

步骤b中，所述稀释的溶液为体积分数为70%的甲醇水溶液。

9.根据权利要求5-8任意一项所述的方法，其特征在于：步骤c中，检测时的进样量为20μL。