[发明专利]用于检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的LAMP引物及其应用

权利要求书

1.一套用于检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的LAMP引物，其特征在于包括2条外引物、2条内引物及2条环引物，所述外引物、内引物及环引物的核苷酸序列如下：

内引物：FIP：5'-TCATCGCGGTACCCCTGGAATAATTTATGGGCTGACGGAGGA-3'

内引物：BIP：5'-TGTCTTTTCCGGATGGTGCGTCCGGTCTTACGTGAACAGAC-3'

外引物：F3：5'-AGTCTTGACGGGCAGAGT-3'

外引物：B3：5'-CACTGTATTGCGCAGAGGAA-3'

环引物：LF：5'-CCCCATCCATATAAGGAGTCCC-3'

环引物：LB：5'-GGAAATTATGTATCAACGCAGGGAC-3'。

2.权利要求1所述的LAMP引物在检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因中的应用。

3.一种检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的荧光LAMP方法，其特征在于包括以下步骤：该方法以大肠杆菌DNA为模板，以大肠杆菌F17菌毛黏附素基因构建的重组质粒为阳性对照，以无菌水为阴性对照，用权利要求1所述的引物对大肠杆菌F17菌毛黏附素基因进行LAMP扩增，采集荧光信号；若待测样品和阳性标准品能扩增出荧光信号，而阴性对照扩增不出信号，则表明待测样品含有大肠杆菌F17菌毛黏附素基因，若待测样品和阴性对照扩增不出荧光信号，而阳性标准品能扩增出荧光信号，则表明待测样品不含有大肠杆菌F17菌毛黏附素基因。

4.如权利要求3所述检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的荧光LAMP方法，其特征在于，所述LAMP扩增的反应体系为：

5.如权利要求3所述检测大肠杆菌F17菌毛黏附素基因的荧光LAMP方法，其特征在于：所述LAMP扩增的反应温度是65℃。