[发明专利]评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法

权利要求书

1.一种评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法包括免疫毒性指标检测、血管刺激性检测、体外溶血检测和全身主动过敏检测；所述免疫毒性指标检测采用食蟹猴为试验动物，所述免疫毒性指标检测包括淋巴细胞分型测定，补体、免疫球蛋白、循环免疫复合物测定和细胞因子含量测定。

2.根据权利要求1所述的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述间充质干细胞以生理盐水为溶剂，且添加2%人血白蛋白制剂。

3.根据权利要求1所述的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述淋巴细胞分型测定的指标为：CD45+CD3+、CD45+CD3+CD4+、CD45+CD3+CD8+。

4.根据权利要求1所述的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述淋巴细胞分型测定方法包括：对食蟹猴进行第1、3、5次给药后1天及恢复期第84天分别进行采血，采用流式细胞分析仪按照流式细胞术进行检测；所述采血部位为猴下肢隐静脉或其它适宜部位；

和/或，所述补体、免疫球蛋白、循环免疫复合物测定的指标为免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A、补体3、补体4和循环免疫复合物；所述补体、免疫球蛋白、循环免疫复合物测定方法包括：对食蟹猴进行第1、3、5次给药后1天及恢复期第84天分别进行采血，然后进行检测；

和/或，所述细胞因子含量测定中检测的细胞因子为IL-4、IL-6和IFN-γ；所述细胞因子含量测定方法包括：对食蟹猴进行第1、3、5次给药，每次给药前及给药后6小时和24小时，恢复期第84天分别进行采血，然后进行检测；采血检测前食蟹猴禁食至少12小时，不禁水；自猴下肢隐静脉或其他适宜部位采血。

5.根据权利要求4所述的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述采血得到的血液样品用肝素钠抗凝；血液样品在15-25℃存放48小时内完成检测，或者，在2-8℃存放3天内完成检测；

将补体、免疫球蛋白的待测血液样品室温进行1800×g离心10分钟，分离血清进行检测或直接采用相应时间点所采集的血液样品进行检测；将循环免疫复合物的待测血液样品在2-8℃下进行1800×g离心10 分钟，分离血清，在-24至-18℃冻存待检；

细胞因子含量测定的待测血液样品在2-8℃下进行1800×g离心10分钟，分离血清用于检测或于-66℃以下保存待用；采用电化学发光系统进行检测。

6.根据权利要求2所述的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，其特征在于，所述全身主动过敏检测以豚鼠为试验动物，阳性对照组是给予4 mg/只卵清白蛋白溶液，试验组包括两组，一组为不添加人血白蛋白的间充质干细胞溶液，另一组为添加了人血白蛋白的间充质干细胞溶液；间充质干细胞溶液的浓度为2×10⁶ 细胞/mL。