[发明专利]评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法

说明书

本发明涉及一种评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，所述方法主要采用免疫毒性指标检测、血管刺激性实验、体外溶血实验、豚鼠全身主动过敏实验来评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应。本发明的有益效果：本发明的评价方法有针对性的设计了淋巴细胞分型分析、免疫补体和炎症相关细胞因子的检测实验，可以有效的评估干细胞对健康机体的可能造成的免疫毒性反应；考虑到干细胞和其他生物制剂的不同，不同生产企业的间充质干细胞回输制剂的配方也不同，增加了体外溶血实验；主动全身过敏实验采用的模式动物是豚鼠，为了检验过敏阳性原因究竟是干细胞或是白蛋白，加了一组不含人血白蛋白的实验组。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法。

背景技术

近两年来，在干细胞临床转化方面国家不断给予各项政策支持，加大投入人力财力支持干细胞临床转化。现如今，中国干细胞监管政策试行“双轨制”，一是以医疗机构为主体，将干细胞应用作为医疗技术，报国家卫健委备案，即医疗机构/项目备案途径；二是以干细胞生产企业为主体，将干细胞作为药品，申报国家药监局，即药品评审审批途径。在干细胞新药方面，制定了《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则(试行)》与“60天临床试验默示许可”的新药审批新制度，给我国干细胞新药的研发和申报提供了新的发展机遇。同时，还设立国家“干细胞及转化研究”重点专项推动干细胞治疗药物的研制。而在提交新药审批之前，应该对此药完成安全性评价，指采用大于临床用药剂量，或长于临床用药时间给动物用药，发现并评价药物对动物机体潜在毒性作用，毒性表现，靶器官损伤的可逆性。

药物的安全性评价一般分为毒理性研究和药理性研究，在毒理性研究中，免疫毒性是较为重要的一部分，免疫毒性实验的结果揭示了此款药品使用到机体后是否会引起免疫系统的特异性免疫反应，从而可推测使用人群和使用安全性。免疫毒性实验主要包括了免疫组织和病理形态学、免疫组织化学、免疫化学(ELISAs,IgG,C3)、蛋白毒代动力学、免疫原性、抗药抗体、中和抗体、细胞因子定量、流式细胞术、活组织检测(BIOPSY)、TDAR(T细胞依赖的抗体反应)、体外溶血、血管刺激、主动过敏实验等内容。

间充质干细胞是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名，具有亚全能分化潜能，在特定的体内外环境下，能够诱导分化成为多种组织细胞；是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。在临床应用也最多，与造血干细胞联合应用，可以提高移植的成功率，加速造血重建。当患者接受大剂量化疗后，将间充质干细胞与造血干细胞一同输入，可明显加速患者血细胞恢复时间，且安全无不良反应。间充质干细胞不仅存在于骨髓中，也存在于骨骼肌、骨外膜和骨小梁中。

间充质干细胞的安全性评价不同传统化药，干细胞的动物安全性评价还属于新兴领域，其属于生物制品，并且具有生物活性、种属特异性及无法预料的多种组织亲和性，在使用和储存时和传统的药物或疫苗等生物制剂有很大程度的不同，并且其来源于人体，培养过程中添加了人源的添加物和多种化学重组物质，综上各种因素，对其临床前安全评价尚有较大的难度，现有常规的临床前安全评价方法更加适合的是可量产的化药，常规实验方法的设计不适合于间充质干细胞的安评实验。

鉴于此，申请此专利。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，是针对于“间充质干细胞”的免疫毒性和特异性免疫反应的安全性评价，本发明的评价方法设计区别于传统药品的评价方案和评价指标，设计了几种检测实验、并做了针对性的检测和选择了合适的模式动物，具有客观合理的评价结果，对进一步的临床试验具有指导意义。

本发明的目的是提供一种评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法。

根据本发明的具体实施方式的评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法，所述评价间充质干细胞是否能够引起机体免疫反应的方法包括免疫毒性指标检测、血管刺激性检测、体外溶血检测和全身主动过敏检测。