[发明专利]一种肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法，其中肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2。本发明采用多株多抗分别交联到胶乳微球上混合后形成的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，相比酶联免疫法，该方法测定TSGF，可在全自动生化分析仪上使用，成本低廉且自动化高节省检测时间，相比于比色法该方法具有更高的灵敏度和特异度。

技术领域

本发明涉及免疫学测定分析领域，具体涉及一种肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

恶性肿瘤的早期诊断一直是目前十分备受关注的问题。人们虽普遍认为AFP是最好的肝癌诊断指标，但有关文献报道，AFP在肝癌诊断中的阳性率只有60％～70％，CA199对胰腺癌诊断的敏感性为70％，CEA对肺癌诊断的灵敏度仅为65％。由此可见各项指标单独测定对恶性肿瘤的诊断有一定的局限性。

肿瘤特异性生长因子(Tumor specific growth factors，TSGF)是1989年加拿大多伦多大学学者发现的肿瘤标志物，它是肿瘤在形成和生长时促使肿瘤周边毛细血管大量增殖并释放到外周血液中的因子，TSGF属于非血细胞生长因子大类，相对分子质量不大，是数种国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物的统称，此类物质包括上皮生长因子(Epidermal Growth Factor，EGF)、神经细胞生长因子(Nerve Growth Factor，NGF)、转化生长因子(Transforming Growth Factor-β，TGF-β)、肝细胞生长因子(HepatocyteGrowth Factor，HGF)等。能促进肿瘤形成、生长、扩散，其机制可能是：直接诱导靶细胞内与恶性转化有关的显性表达；抑制机体免疫监视系统；使机体细胞因子网络调节严重失控，并可抑制IgG、IgM产生，影响某些克隆的T淋巴细胞分化，增加肿瘤细胞对自然杀伤(NK)细胞的抵抗性，促进肿瘤血管增生。

目前，市售的肿瘤特异性生长因子(TSGF)检测试剂盒主要是采用酶联免疫法和比色法，酶联免疫法存在灵敏度低、线性范围窄、操作步骤复杂、耗时等问题，且无法满足临床应用要求；比色法存在灵敏度低、特异度差的问题。因此，目前尚需一种污染小、灵敏度高、操作简单、自动化程度高、特异性好、成本低的肿瘤特异性生长因子(TSGF)的快速定量检测方法。

发明内容

本发明提供了一种肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法，可代替酶联免疫和比色检测方法，提高检测效率，扩大检测样本量。同时该方法和比色法相关性良好，且适用于各类全自动生化分析仪分析，便于临床应用。

为实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种肿瘤特异性生长因子胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2；

所述试剂R1包括如下组分：

所述试剂R2包括如下组分：

所述混合多克隆抗体胶乳微球为EGF、NGF、TGF-β、HGF四种多克隆抗体胶乳微球按1:2:1:1混合后的混合物。

进一步的，四种所述多克隆抗体胶乳微球由EGF、NGF、TGF-β、HGF四种多克隆抗体分别交联到聚苯乙烯胶乳微球上得到的产物。

进一步的，还包括试剂校准品，所述试剂校准品包括如下组分：

进一步的，所述试剂盒的分析方法如下：

分析方法:两点终点法；

反应方向:上升反应；

校准方式:Logit-Log(4P)；