[发明专利]一种检测青稞条纹病的LAMP引物组及其应用在审
申请号: | 202011409318.7 | 申请日: | 2020-12-04 |
公开(公告)号: | CN112359131A | 公开(公告)日: | 2021-02-12 |
发明(设计)人: | 姚强;胡章薇;郭青云;闫佳会;吴昆仑;侯璐 | 申请(专利权)人: | 青海省农林科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 赵浩竹 |
地址: | 810016 *** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 青稞 条纹病 lamp 引物 及其 应用 | ||
1.一种检测青稞条纹病的LAMP引物组,其特征在于,包括内引物FIP/BIP、外引物F3/B3和环引物LB,所述的内引物FIP/BIP的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述的外引物F3/B3的核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示,所述的环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
2.根据权利要求1所述的一种检测青稞条纹病的LAMP引物组,其特征在于,所述引物还包括将FIP/BIP、F3/B3和LB序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后具有与上述序列具有相同功能的DNA分子。
3.一种检测青稞条纹病的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括内引物FIP/BIP、外引物F3/B3和环引物LB。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中内引物、外引物和环引物的摩尔浓度比为8:2:1。
5.一种检测青稞条纹病的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提待测样品DNA;
2)以获得的DNA为模板,利用上述内引物FIP/BIP、外引物F3/B3和环引物LF/LB进行扩增反应;
3)反应结束后加入SYBR GreenI染料进行判定。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,反应体系为:10×IsothermalAmplification Buffer 2.5μL,MgSO4 10 mM,dNTP Mixture 1mM,甜菜碱0.8M,Bst2.0DNA聚合酶0.32U·μL-1,内外引物及环引物分别为1.6μm,0.2μm和0.4μm,DNA模板为2μL补充无菌去离子水至25μL;反应条件为63℃,60min。
7.权利要求1所述的引物组在检测青稞条纹病中的应用。
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