[发明专利]利用PEI-Fc原位生成纳米银用于放大识别色氨酸对映体的方法

说明书

本发明涉及一种利用PEI‑Fc原位生成纳米银用于放大识别色氨酸对映体的方法，本发明利用PEI‑Fc做还原剂和保护剂，原位还原HAuCl₄和AgNO₃，制备金纳米粒子、银纳米粒子；包括以下步骤：PEI‑Fc@AuNPs、PEI‑Fc@AgNP,PEI‑Fc@AuNPs‑D‑Trp/PEI‑Fc@AgNPs‑D‑Trp/GC和PEI‑Fc@AuNPs‑D‑Trp/PEI‑Fc@AgNPs/L‑Trp/GC电极的制备以及电化学识别色氨酸对映体。本发明的有益效果为：修饰电极的制备过程简单，环保，且该修饰电极对色氨酸对映体具有明显的识别效果。

技术领域

本发明涉及一种利用PEI-Fc原位生成纳米银用于放大识别色氨酸对映体的制备方法，属于电化学分析和生物技术领域。

背景技术

自然界中的大部分物质都是具有手性的，就像具有手性的氨基酸，基本上只有一种构型对人类的生活会产生有利影响，另一种对人类无益或者产生毒副作用。众所周知，Trp被认为是神经递质血清素的前体；L-Trp的含量与肝病密切相关；肽类抗生素和免疫抑制剂的制备需要D-Trp作为中间体。所以识别手性氨基酸对人类生活来说具有重要的研究意义。电化学分析方法具有操作简便、响应时间快、反应灵敏等优点，在手性识别氨基酸时具有较好的应用前景。

在现有技术中，涉及纳米金、纳米银在识别手性色氨酸的应用，但大多涉及比色法识别手性氨基酸。而在电化学手性识别色氨酸中的应用不多。其中在“CN201910958326.8一种分子印迹Au纳米粒子手性界面的构建方法”中涉及修饰电极的制备以及电化学性能测试，但该修饰电极用于Trp对映体的电化学对映选择性识别效果不佳。

因此如何基于简单快速纳米金、纳米银制备得到电化学识别手性氨基酸效果好的电极以及识别方法，是本发明所研究的重点。

发明内容

为了解决背景技术中的问题，本发明涉及一种利用PEI-Fc原位生成纳米银用于放大识别色氨酸对映体的方法，本发明利用PEI-Fc分别与HAuCl₄、AgNO₃原位生成金纳米粒子、银纳米粒子。由于纳米粒子与D-Trp结合的能力大于与L-Trp结合，另一方面铜离子与D-Trp的结合能力大于与L-Trp的结合能力，因此银纳米粒子与D-Trp作用强于其与L-Trp作用，铜离子的加入可作为桥梁，使得更多的D-Trp通过铜离子连接形成聚集体而组装到电极表面，这样有更多的银纳米粒子组装到电极表面，通过跟踪纳米银的氧化峰电流大小来间接区分Trp对映体，从而起到了放大识别色氨酸对映体的目的。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种利用PEI-Fc原位生成纳米银用于放大识别色氨酸对映体的制备方法，其中包括用于识别色氨酸对映体的修饰电极的制备，电极制备方法包括为：

a、PEI-Fc@AuNPs的制备：将5-15mMHAuCl₄溶液缓慢的加入0.5-2mg/mLPEI-Fc溶液中反应一段时间，得到PEI-Fc@AuNPs；

b、PEI-Fc@AgNPs的制备：将60-100mMAgNO₃溶液逐滴加入0.5-2mg/mL PEI-Fc溶液中反应一段时间，得到PEI-Fc@AgNPs。

c、PEI-Fc@AuNPs-D-Trp/GC电极的制备：取0.05–10mMD-Trp溶液逐滴加入步骤a制备的PEI-Fc@AuNPs溶液中反应一段时间后，然后将玻碳电极浸泡在溶液中一段时间，得到PEI-Fc@AuNPs-D-Trp/GC电极。

d、PEI-Fc@AgNPs-D-Trp聚集溶液的制备：取0.05–10mMD-Trp溶液逐滴加入步骤b中制备的PEI-Fc@AgNPs溶液中反应一段时间后，加入5-15mM铜离子溶液反应一段时间，得到PEI-Fc@AgNPs-D-Trp聚集溶液。