[发明专利]一种表达荧光素酶的VRE及其用途在审

专利信息
申请号: 202011417854.1 申请日: 2020-12-07
公开(公告)号: CN112481182A 公开(公告)日: 2021-03-12
发明(设计)人: 滑明溪;王宇光;陈晨;段昂;袁临天;曾辉;李昂 申请(专利权)人: 首都医科大学附属北京地坛医院
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/74;C12Q1/06;A61L2/10;A61L2/18;A61L101/20;C12R1/01
代理公司: 北京国标律师事务所 11753 代理人: 姚克枫
地址: 100015 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 表达 荧光 vre 及其 用途
【权利要求书】:

1.一种质粒,其特征在于,所述质粒包括荧光素酶基因簇LUX A/B/C/D/E,该质粒能够在耐万古霉素的肠球菌(Vancomycin-Resistant Enterococcus,VRE)中启动LUX A/B/C/D/E基因的表达,所述质粒为可用于革兰氏阳性菌的质粒。

2.一种基因修饰的耐万古霉素的肠球菌(Vancomycin-Resistant Enterococcus,VRE),其特征在于,所述基因修饰的VRE能稳定表达荧光素酶。

3.一种基因修饰的VRE的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:

(1)制备包含LUX A/B/C/D/E基因簇的质粒;

(2)制备电转化感受态VRE;

(3)将步骤(1)获得的包含LUX A/B/C/D/E基因簇的质粒电转化感受态VRE,挑选阳性菌落。

4.一种权利要求2所述基因修饰的VRE的应用,其特征在于,所述应用包括在筛选杀菌方法中的应用,在筛选药物中的应用,或者,在制备动物模型中的应用。

5.一种计算细菌浓度的评估方法,其特征在于,所述评估方法包括绘制不同浓度权利要求2所述的基因修饰的VRE的荧光值的标准曲线,并通过检测荧光值计算VRE的浓度。

6.一种杀菌方法的评估方法,其特征在于,所述评估方法包括利用权利要求2所述基因修饰的VRE对杀菌方法进行评估。

7.一种药物筛选方法,其特征在于,所述药物筛选方法包括利用权利要求2所述基因修饰的VRE对药物进行筛选。

8.一种动物模型的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括将权利要求2所述基因修饰的VRE通过鼻饲、灌胃、腹腔注射、尾静脉注射等方法注入动物体内。

9.一种VRE的杀菌方法,其特征在于,所述杀菌方法包括利用紫外照射或者84消毒液对携带VRE的物品进行杀菌。

10.如权利要求9所述的杀菌方法,其特征在于,所述杀菌方法包括紫外照射30min以上,或者以10%的84消毒液对物品进行消毒。

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