[发明专利]外源基因可控表达的腺病毒包装方法

权利要求书

1.一种腺病毒包装载体，具有两个ITR片段及插入两个ITR片段之间的基因表达盒，

所述基因表达盒包含顺次连接的启动子CMV、阻遏型操作子以及目的基因，当所述目的基因表达时会对病毒包装产生负面影响，其中，所述目的基因选自自杀基因、细胞凋亡基因和癌基因，或者，所述目的基因为细胞周期相关基因，或者，所述目的基因直接抑制病毒的复制和/或组装，

当有阻遏物存在时，所述阻遏型操作子能够阻遏其下游目的基因的表达，

所述阻遏型操作子选自色氨酸操作子TrpO元件或Cumate-CuO可调控系统的CuO元件，

所述TrpO元件插入到所述基因表达盒的启动子中形成CMV-TrpO v2，所述CMV-TrpO v2的序列如下所示：

cgttacataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgaccttatgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgatgcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttccaaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtgggaggtctatataagcagaactagttaactagtacgtcagatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgactctac；，

所述CuO元件插入到所述基因表达盒的启动子中形成CMV-CuO v1，所述CMV-CuO v1的序列如下所示：

Cgttacataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgaccttatgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgatgcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttccaaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtgggaggtctatataagcagagctcgtttagtgaaccgtcagatcgcctggagacgttgaaaacaaacagacaatctggtctgtttgtattataagtaaggactagt。

2.根据权利要求1所述的腺病毒包装载体，所述目的基因对包装细胞产生细胞毒性。

3.根据权利要求1所述的腺病毒包装载体，所述目的基因选自iCre基因或Caspase 8基因。

4.根据权利要求1~3任一项所述的腺病毒包装载体，所述腺病毒包装载体还包含报告基因、增强子、内部核糖体进入位点、终止子和多腺苷酸化信号中的至少一种。

5.腺病毒包装载体系统，其包括权利要求1~4任一项所述的腺病毒包装载体以及框架载体。