[发明专利]一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法在审
申请号: | 202011424527.9 | 申请日: | 2020-12-08 |
公开(公告)号: | CN112450074A | 公开(公告)日: | 2021-03-09 |
发明(设计)人: | 裘江;张小惠;赵冰雪 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01G24/10;A01G24/15 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 胡晶 |
地址: | 200235 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 叶片 繁体 建立 方法 | ||
1.一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:选取平均长度为3cm、宽度为2cm的血参叶片作为外植体,首先将血参叶片用75%乙醇浸泡10s,然后用double distilled H2O冲洗3次,再用2%的NaClO消毒液浸泡8min,最后用double distilled H2O冲洗4~5次,获得无菌血参叶片;
S2:所述步骤S1获得的无菌血参叶片用无菌手术刀切分若干份,接种到PH值为5.8的MS诱导培养基中,在培养温度为25±1℃的条件下暗培养14d,被切分的血参叶片形成愈伤组织;
S3:将所述步骤S2得到的无菌血参叶片移植到PH值为5.8的MS增殖培养基中,在光照强度阈值为4800~60001x,光照培养16h/d的条件下培养20d;
S4:将所述步骤S3的无菌血参叶片移植到PH值为5.8的芽分化培养基中,在光照强度阈值为4800~60001x,光照培养16h/d的条件下培养诱导出芽;
S5:将所述步骤S4的无菌血参叶片用无菌刀切分为单株,移植到PH值为5.8的生根培养基中,在培养温度为25±1℃,光照培养16h/d的条件下培养30d;
S6,将所述步骤S5得到的血参生根苗移栽至装有营养基质土的花盆中,温室温度为25℃。
2.根据权利要求1所述的一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,所述MS诱导培养基为MS基本培养基中添加3g/L琼脂、30g/L蔗糖、4.43g/L MS、2mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA。
3.根据权利要求1所述的一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,所述MS增殖培养基为MS基本培养基中添加3g/L琼脂、30g/L蔗糖、4.43g/L MS、2mg/L 6-BA和0.5mg/L NAA。
4.根据权利要求l所述的一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,所述芽分化培养基为MS基本培养基中添加3g/L琼脂、30g/L蔗糖、4.43g/L MS、0.5mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA。
5.根据权利要求1所述的一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,所述生根培养基为MS基本培养基中添加3.5g/L琼脂、15g/L蔗糖和2.215g/L MS。
6.根据权利要求1所述的一种血参叶片组培与快繁体系的建立方法,其特征在于,所述营养基质土包括基质土、蛭石和珍珠岩,其配比为基质土∶蛭石∶珍珠岩为3∶1∶1。
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