[发明专利]一种毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒,其包括提取液、包被有鼠抗甲基苯丙胺单克隆抗体的酶标板，检测抗体以及酶标二抗，所述检测抗体为兔抗甲基苯丙胺多克隆抗体，所述酶标二抗为山羊抗兔IgG‑HRP。运用该试剂盒对毛发中甲基苯丙胺类毒品的含量进行检测的方法时，先将毛发剪成小段后，置于容器中，利用所述提取液进行毒品提取，获得待测提取液；再利用双抗体夹心ELISA法检测待测提取液中的毒品含量。本发明可以对毛发中甲基苯丙胺类毒品进行定量检测，能达到国际检测阈值为0.2ng/mg的要求，特异性好，灵敏度高；操作简便，提取快速，无需特殊设备即可完成。

技术领域

本发明属于违禁品监测分析技术领域，特别涉及一种毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒及检测方法。

背景技术

检验吸毒人员是否吸食毒品的常规检材为体液检材，如血液和尿液。但血液检材使用有一定的风险，由于很多吸毒者本身携带有传染性疾病病毒，采集血液检材对操作者有一定的危险，有时被采集者也不配合血液采集。尿液检材易受污染，尿液现场取样看管涉及隐私，不看管涉及尿液稀释或掺假。所以寻找一种检材提取方法简单、快速，检测结果准确、追溯性强，就显得十分重要。国家禁毒办于2016年对《吸毒成瘾认定办法》进行了修订，将毛发样本认定为吸毒成瘾的主要依据之一。毛发和体液相比，具有操作简便、存储稳定、容易保存、不易作假和可用检测时限超长等优点，还可提供吸毒者吸食苯丙胺类毒品的时间和残留量。

目前毒品的检测技术主要有ELISA法(enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定)、胶体金免疫检测方法等。胶体金检测方法由于其操作简单、省时、结果易判读等特点已广泛用于血液或尿液中苯丙胺类毒品的检测，但由于其灵敏度较低无法达到毛发毒品检测国际阈值的要求，无法应用于毛发中甲基苯丙胺类的检测。而ELISA法灵敏度可满足毛发中甲基苯丙胺类检测要求。毛发中甲基苯丙胺类的含量较低，甲基苯丙胺类毒品能否从毛发检材中被简单、快速地提取出来，不仅关系到检测试剂盒的开发成本和检测用时，也会影响到检测结果的准确性；毛发中毒品及其代谢物的国际检测阈值为0.2ng/mg，需要使用检测灵敏度更高的技术用于毛发检测，常规的检测方法特异性不足，容易造成假阳性。所以研究出一种操作简便，提取快速，不依赖贵重仪器，检测特异性和灵敏度高的检测方法具有重要的积极意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简便，提取快速，不依赖贵重仪器，检测特异性和灵敏度高的毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒及检测方法。

为实现本发明的目的，本发明提供了一种毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒，其包括提取液、包被有鼠抗甲基苯丙胺单克隆抗体的酶标板，检测抗体以及酶标二抗，所述检测抗体为兔抗甲基苯丙胺多克隆抗体，所述酶标二抗为山羊抗兔IgG-HRP(HRP标记的羊抗兔)。

优选地，所述提取液包括裂解液，所述裂解液由浓度为1mol/L的NaOH溶液和质量浓度为10％的SDS溶液组成。

优选地，所述提取液还包含中和液，所述中和液为pH值为9.6的醋酸-醋酸钠缓冲溶液。

优选地，所述包被有鼠抗甲基苯丙胺单克隆抗体的酶标板中，鼠抗甲基苯丙胺单克隆抗体的浓度为20μg/mL。

优选地，所述检测抗体为1:1000稀释的兔抗甲基苯丙胺多克隆抗体，所述酶标二抗为1:5000稀释的山羊抗兔IgG-HRP。

本发明还提供了一种毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测方法，其使用上述的毛发中甲基苯丙胺类毒品的检测试剂盒进行检测，所述检测方法包括以下步骤：

S1、将毛发剪成小段后，置于容器中，利用所述提取液进行毒品提取，获得待测提取液；

S2、利用双抗体夹心ELISA法检测待测提取液中的毒品含量，其包括以下步骤：