[发明专利]一种裸体方格星虫多糖的制备方法和应用

权利要求书

1.一种裸体方格星虫多糖的应用，其特征在于，所述方格星虫多糖用于作为原料制备速溶泡腾片，该速溶泡腾片由以下重量份的原料组成：方格星虫多糖8-10份、方格星虫提取物20-25份、姜黄粉0.5-2份、碳酸氢钠20-25份、柠檬酸18-23份、麦芽糊精8-10份、润滑剂1-2份和粘合剂 3-4份；

所述方格星虫提取物的制备方法为：将去除内脏并清洗后的裸体方格星虫体壁在55-60℃真空干燥箱中放置3-5 h，然后取出，将样品粉碎过50-70目筛，过筛后的方格星虫粉末加入10倍体积蒸馏水在沸水浴中热回流提取2-4次，每次85-95min，抽滤，合并滤液，旋转蒸发浓缩，浓缩液冷冻干燥后粉碎，过110-130目筛，得到方格星虫提取物备用；

所述方格星虫多糖的制备方法为：

（1）取新鲜的裸体方格星虫，去除泥沙及内脏并清洗，接着进行匀浆得到匀浆液；

（2）在步骤（1）所得匀浆液中加入95-105℃的去离子水，提取4.5-5.5h，过滤去除不溶性成分，接着将滤液真空浓缩至原体积的1/4，再向滤液中加入占滤液4倍体积的无水乙醇，静置过夜，然后在温度为4-6℃，转速为6500-7500rpm 的条件下，离心4-6min，倾出上清液并收集沉淀；

（3）将步骤（2）所得沉淀用无水乙醇洗涤 2-3次，再离心，收集洗涤后的沉淀，用蒸馏水将沉淀溶解，再加入萃取剂氯仿－正丁醇萃取除去游离蛋白质，得到粗糖提取液备用；

将步骤（3）所得粗糖提取液过 DEAE-Sepharose 离子交换柱，用流速0.5mL/min ddH₂O洗脱柱子，进一步通过 Sepharose CL-6B 层析柱，洗脱液为0.3ml/min 的双蒸水；HPLC 分析洗脱液吸收峰用苯酚-硫酸法在490 nm 和紫外分光光度法在 280nm 隔管测定多糖溶液的吸光度值，绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线合并同一色谱峰洗脱液，用 ddH₂O 脱盐，在4℃条件下透析 48h；透析后用葡聚糖凝胶色谱柱对多糖进一步纯化，苯酚-硫酸法在 490 nm测定多糖溶液的吸光度值，绘制洗脱曲线，合并同一色谱峰洗脱液，冷冻干燥，然后粉碎过100-120目筛，得到方格星虫多糖。

2.根据权利要求1所述的一种裸体方格星虫多糖的应用，其特征在于，所述步骤（1）中所选取的方格星虫单体体重为10-15g。

3.根据权利要求1所述的一种裸体方格星虫多糖的应用，其特征在于，所述步骤（2）中的匀浆液与去离子水的体积比为1:2-3。

4.根据权利要求1-3任一项所述的一种裸体方格星虫多糖的应用，其特征在于，所述速溶泡腾片的制备方法如下：

1）制备方格星虫提取物：将去除内脏并清洗后的裸体方格星虫体壁在55-60℃真空干燥箱中放置3-5 h，然后取出，将样品粉碎过50-70目筛，过筛后的方格星虫粉末加入10倍体积蒸馏水在沸水浴中热回流提取2-4次，每次85-95min，抽滤，合并滤液，旋转蒸发浓缩，浓缩液冷冻干燥后粉碎，过110-130目筛，得到方格星虫提取物备用；

2）制备姜黄粉：取新鲜姜黄，清洗后榨汁，旋转蒸发浓缩至原有体积1/5，将浓缩液冷冻干燥后粉碎，过115-125目筛，得姜黄粉备用；

3）制备泡腾片：将柠檬酸、碳酸氢钠分别在55-65℃的条件烘干 2-2.5h，取方格星虫多糖、方格星虫提取物、姜黄粉和碳酸氢钠干混，再加粘合剂进行湿混，制得 碱性颗粒；接着取柠檬酸和填充剂麦芽糊精干混，加入粘合剂湿混，制得酸性颗粒；将碱性颗粒和酸性颗粒分别在40-50℃下烘干至含水量小于3%，接着将碱性颗粒和酸性颗粒混合，并在混合颗粒中加入润滑剂，再进行混匀、压片，即得所述泡腾片。

5.根据权利要求4所述的一种裸体方格星虫多糖的应用，其特征在于，所述粘合剂是由体积分数为3%的PVP和体积分数为75%的乙醇溶液按照质量比为1:2-3的比例混合所得。