[发明专利]一种腈水合酶氨基酸基序的改造及其应用

权利要求书

1.一种腈水合酶突变体，其特征在于，所述腈水合酶由α亚基、β亚基和调控蛋白组成；所述突变体是将腈水合酶亲本的α亚基的第6和/或126位突变，和/或β亚基的第46位突变；所述腈水合酶亲本的α亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，β亚基的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，调控蛋白的氨基酸算序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体包括如下(a)-(f)任一：

(a)将β亚基的第46位突变为赖氨酸；

(b)将α亚基的第6位突变为苏氨酸；

(c)将α亚基的第126位突变为酪氨酸，

(d)将α亚基的第126位突变为酪氨酸，并将β亚基的第46位突变为赖氨酸；

(e)将α亚基的第6位突变为苏氨酸，并将β亚基的第46位突变为赖氨酸；

(f)将α亚基的第6位突变为苏氨酸、第126位突变为酪氨酸，并将β亚基的第46位突变为赖氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的重组质粒。

5.表达权利要求1或2所述突变体，或含有权利要求3所述基因的宿主细胞。

6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含原核或真核微生物。

7.一种生产酰胺类物质的方法，其特征在于，以腈类物质为底物，利用权利要求1或2所述突变体催化生成酰胺类物质。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述腈类物质包括异丁腈、正戊腈、丙烯腈、烟腈、2-氰基吡嗪、苯甲腈、肉桂腈和萘甲腈。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述酰胺类物质包括异丁酰胺、戊酰胺、丙烯酰胺、烟酰胺、吡嗪酰胺、萘甲酰、苯甲酰胺和肉桂酰胺。

10.权利要求1或2所述突变体，或权利要求3所述基因，或权利要求4所述重组质粒，或权利要求5或6所述宿主细胞在制备酰胺类物质中的应用。