[发明专利]一种基于酶联免疫法检测新型冠状病毒抗体的试剂盒

权利要求书

1.一种基于酶联免疫法检测新型冠状病毒抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

包被新型冠状病毒重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的酶标板、辣根过氧化物酶标记的二抗、样本稀释液、底物溶液、终止反应液和质控品；

所述重组核衣壳蛋白中利用寡聚脯氨酸残基连接原始核衣壳蛋白的优势表位，并利用寡聚赖氨酸残基形成C端；

所述重组棘突蛋白中利用寡聚脯氨酸残基连接原始棘突蛋白S1的优势表位，并利用寡聚赖氨酸残基形成C端；

所述重组核衣壳蛋白为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

所述重组棘突蛋白为SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标板上重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的质量比为(0.25~4):1。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述底物溶液包括TMB；

所述辣根过氧化物酶标记的二抗包括辣根过氧化物酶标记的抗人IgM抗体、辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体或辣根过氧化物酶标记的抗人IgA抗体中的任意一种或至少两种的组合。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液包括牛血清白蛋白、抑菌剂、蔗糖、海藻糖或阻断剂中的任意一种或至少两种的组合。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品；

其中，所述阳性质控品为含新型冠状病毒抗体的缓冲液。

6.一种如权利要求1~5任一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

制备包被新型冠状病毒重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的酶标板；

将所述酶标板、辣根过氧化物酶标记的二抗、样本稀释液、底物溶液、终止反应液和质控品分别进行包装，得到所述试剂盒。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述包被新型冠状病毒重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的酶标板的制备方法具体包括：

采用包被液分别稀释新型冠状病毒的重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白，再按(1~3):1的质量比将重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白转移至酶标板上，而后使用封闭液封闭，得到所述包被新型冠状病毒重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的酶标板。

8.一种如权利要求1~5任一项所述的试剂盒以非疾病诊断和/或治疗为目的的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括如下步骤：

（1）使用样本稀释液对待测样本进行稀释；

（2）将所述稀释后的待测样本转移至包被新型冠状病毒重组核衣壳蛋白和重组棘突蛋白的酶标板上，孵育；

（3）在所述孵育结束后，洗涤所述酶标板，再加入辣根过氧化物酶标记的二抗，孵育，洗涤；

（4）加入底物溶液，避光孵育后加入终止反应液，测量吸光度，得到检测结果。

9.根据权利要求8所述的使用方法，其特征在于，步骤（2）所述孵育的时间为20~30min，温度为35~37℃；

步骤（3）所述孵育的时间为20~30 min，温度为35~37℃；

步骤（4）所述孵育的时间为8~12 min，温度为35~37℃；

所述检测结果中指数I≥1.0，则待测样本为阳性；所述检测结果中指数I1.0，则待测样本为阴性。