[发明专利]检测异基因造血干细胞移植后侵袭性曲霉病风险的SNP位点的专用引物及应用有效
申请号: | 202011458525.1 | 申请日: | 2020-12-10 |
公开(公告)号: | CN112391463B | 公开(公告)日: | 2022-10-11 |
发明(设计)人: | 孙于谦 | 申请(专利权)人: | 北京大学人民医院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京邦申诚知识产权代理事务所(普通合伙) 11871 | 代理人: | 简德明 |
地址: | 100044 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 基因 造血 干细胞 移植 侵袭 曲霉 风险 snp 专用 引物 应用 | ||
1.一种用于检测异基因造血干细胞移植后侵袭性曲霉病风险的SNP位点的专用引物,其特征在于:
所述专用引物由引物组1和引物组2组成,其中:
所述引物组1为特异性PCR引物,由如下引物组成:引物对1、引物对2、引物对3;
所述引物对1由序列1所示的单链DNA分子和序列2所示的单链DNA分子组成;
所述引物对2由序列3所示的单链DNA分子和序列4所示的单链DNA分子组成;
所述引物对3由序列5所示的单链DNA分子和序列6所示的单链DNA分子组成;
所述引物组2为单碱基延伸引物,由如下引物组成:单碱基延伸引物1、单碱基延伸引物2、单碱基延伸引物3;
所述单碱基延伸引物1为序列7所示的单链DNA分子;
所述单碱基延伸引物2为序列8所示的单链DNA分子;
所述单碱基延伸引物3为序列9所示的单链DNA分子;
所述SNP位点为:rs4257674、rs3921、rs1800629。
2.根据权利要求1所述的专用引物,其特征在于:
所述引物组1中的引物对1-引物对3中的各条引物为等摩尔比混合,构成扩增引物Mix;
所述引物组2中的单碱基延伸引物1-单碱基延伸引物3为等摩尔比混合,构成单碱基延伸引物Mix。
3.一种用于检测异基因造血干细胞移植后侵袭性曲霉病风险的SNP位点的制剂,其特征在于:
所述制剂中的引物由权利要求1所述的专用引物组成。
4.根据权利要求3所述的制剂,其特征在于:
所述制剂包括试剂一和试剂二;其中:
所述试剂一包括权利要求1所述的引物组1、PCR缓冲液、MgCl2、dNTP和DNA聚合酶;
所述试剂二包括权利要求1所述的引物组2、单碱基延伸缓冲液、单碱基延伸酶、单碱基延伸终止Mix。
5.根据权利要求4所述的制剂,其特征在于:
所述试剂一中,所述引物对1-引物对3中的6条引物在所述试剂一中的浓度均为0.5μM;
所述MgCl2在所述试剂一中的浓度为2mM;
所述dNTP在试剂一中的浓度为0.5mM;
所述DNA聚合酶在试剂一中的浓度为0.2U/μL;
所述试剂二中,所述单碱基延伸引物1-单碱基延伸引物3在试剂二中的浓度均为0.5μM。
6.根据权利要求5所述的制剂,其特征在于:
所述SNP位点为:rs4257674、rs3921、rs1800629。
7.权利要求1-2中任一项所述的专用引物、或权利要求3-4中任一项所述的制剂在制备用于检测异基因造血干细胞移植后侵袭性曲霉病风险的产品中的应用。
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