[发明专利]一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒在审
申请号: | 202011458814.1 | 申请日: | 2020-12-11 |
公开(公告)号: | CN112578119A | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
发明(设计)人: | 许君艳;庄路阳;王丹;杨敏 | 申请(专利权)人: | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N33/543;G01N33/74 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘颖 |
地址: | 450000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 甲氧基 肾上腺素 发光 免疫 检测 试剂盒 | ||
1.一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括样品前处理试剂和检测试剂;
所述样本前处理试剂包含:酸化液、酰化缓冲液、酰化剂溶液;所述酰化剂溶液中的酰化剂为乙酸酐、琥珀酸酐、丁酸酐、己酸酐、辛酸酐、乙酰氯、冰醋酸中的一种或几种;
所述检测试剂包含:包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液,甲氧基肾上腺素的特异性抗体溶液,含有辣根过氧化物酶标记抗抗体的酶结合物溶液,校准品;
或者,所述检测试剂包含:包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液,含有辣根过氧化物酶标记的甲氧基肾上腺素特异性抗体的酶结合物溶液,校准品。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酸化液为pH2、含有酚红指示剂的强酸溶液,所述强酸为盐酸、硫酸中的一种,浓度为0.1~0.5M;酸化液中酚红指示剂的含量为0.0001vt%~0.01vt%。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酰化缓冲液为Bis-Tris、Tris、PBS中的一种,浓度为0.1~10M,pH8.0~9.0。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酰化剂溶液中的溶剂为DMF、DMSO、无水乙醇中的一种或几种;所述酰化剂溶液中的溶剂与酰化剂的体积比为(50~70):1。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述甲氧基肾上腺素的特异性抗体溶液中,甲氧基肾上腺素的特异性抗体的体积百分浓度为0.001%~1%。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,甲氧基肾上腺素的特异性抗体溶液中,所用的抗体稀释液由稀释缓冲液、保护蛋白、防腐剂组成;抗体稀释液中稀释缓冲液的浓度为0.01~0.1M,保护蛋白的质量体积百分比为0.5%~5%,防腐剂的体积百分含量为0.01%~1%;
所述稀释缓冲液为Bis-Tris、Tris-NaCl、PBS中的一种,pH3.0~8.0;
所述保护蛋白为牛血清白蛋白、牛血清、人血清、明胶、酪蛋白中的一种或两种;
所述防腐剂为ProClin300、BRONIDOX、MIT、NaN3的任意组合。
7.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述酶结合物溶液由辣根过氧化物酶标记的抗抗体、酶稀释液组成;
或者,所述酶结合物溶液由辣根过氧化物酶标记的甲氧基肾上腺素特异性抗体、酶稀释液组成;
所述酶稀释液由稀释缓冲液、保护蛋白组成;
所述稀释缓冲液为Bis-Tris、Tris-NaCl、PBS中的一种,pH3.0~8.0;
所述保护蛋白的质量体积百分比为0.5%~5%,保护蛋白为牛血清白蛋白、牛血清、人血清、明胶、酪蛋白中的一种或两种。
8.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液制备时所使用的甲氧基肾上腺素偶联有载体蛋白,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、卵清白蛋白中的一种或几种;
磁微粒混悬液制备时所使用的甲氧基肾上腺素浓度为0.5~5μg/mL;
所述校准品为含有甲氧基肾上腺素的PBS溶液,校准品中甲氧基肾上腺素的浓度为0~5000ng/mL;校准品中PBS溶液的pH控制在2~4。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的试剂盒,其特征在于,采用所述样本前处理试剂进行发光免疫检测的步骤为:
取待测样本,加入酸化液,混匀后在80~100℃孵育20~40min;孵育结束后,待酸化样本冷却至室温,加入酰化缓冲液,混匀;再加入酰化剂,混匀后室温静置至少15min。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,待测样本、酸化液、酰化缓冲液、酰化剂的体积比为(50~150):(200~300):(200~300):(20~30)。
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