[发明专利]一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒。该试剂盒包括样本前处理试剂和检测试剂；样本前处理试剂包含：酸化液、酰化缓冲液、酰化剂溶液；酰化剂溶液中的酰化剂为乙酸酐、琥珀酸酐、丁酸酐、己酸酐、辛酸酐、乙酰氯、冰醋酸中的一种或几种；检测试剂包含：包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液，甲氧基肾上腺素的特异性抗体溶液，含有辣根过氧化物酶标记抗抗体的酶结合物溶液，校准品；或者：包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液，含有辣根过氧化物酶标记的特异性抗体的酶结合物溶液，校准品。本发明试剂盒大幅提高检测效率；本发明具有更高的灵敏度和特异性，大大提高临床符合率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒。

背景技术

目前甲氧基肾上腺素(MN)的市场主流检测方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附测定(ELISA)等，但HPLC耗时比较久、试剂盒仪器成本高、对操作人员的技术要求高且较难实现批量测定，而酶联免疫测定法缺乏准确性和再现性，同时自动化程度低、反应速率慢、检测时间长、易受环境影响，灵敏度较低。

近年来，随着磁微粒偶联技术及化学发光技术的普及，对于甲氧基肾上腺素的检测也开始采用全自动化学发光免疫分析法，即将磁微粒偶联技术、免疫反应技术和化学发光技术相结合，实现了自动化检测，具有高灵敏度、高特异性、高准确度，高稳定性的特点。

磁性微球是一类直径在纳米或微米级的球形复合材料。磁性微球的核心有四氧化三铁或三氧化二铁等超顺磁性材料构成，外围包覆聚苯乙烯或葡聚糖等高分子材料。核心物质具有超顺磁性，使磁珠可以在外加磁场作用下向磁场方向移动达到分离的目的；外围高分子材料可以通过物理或化学的方法活化产生氨基(NH₂-)、羧基(COOH-)或环氧基(—CH(O))等基团，可以与蛋白等生物活性分子偶联。偶联后的磁珠广泛应用于生物标记、生物分子的分离、蛋白的纯化、抗体纯化、分子诊断等领域。化学发光免疫分析中包含两个部分，即免疫反应技术和化学发光技术。其基本原理是免疫反应总的酶作用于发光底物，使之发生化学反应并释放出大量的能量，产生激发态的中间体。这种激发态中间体回到稳定的基态时，可同时发射出光子。利用发光信号检测仪器即可测量出光量子产额，该光量子产额与样品中的待测物质的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。化学发光免疫分析技术常采用双抗体夹心法、竞争法及间接法等反应模式。

公开号为CN109444415A专利中公开了一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒，包括检测系统和样品前处理系统，所述的检测系统包括直接或间接包被有甲氧基肾上腺素抗体的固相载体，甲氧基肾上腺素抗体溶液，亲和素连接示踪物溶液和校准品；或者所述的检测系统包括直接或间接包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液，含有辣根过氧化物酶标记的甲氧基肾上腺素特异性抗体的酶结合物溶液，校准品。所述样品前处理系统包括酸化液，酰化剂和碱性缓冲液。但该检测试剂盒的精密度、灵敏度、检测梯度等方面的产品性能还有待提升。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒。本发明的提供一种更快速的检测试剂盒，首个结果检测需要30min，大幅提高检测效率；本发明具有更高的灵敏度和特异性，大大提高临床符合率。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种甲氧基肾上腺素发光免疫检测试剂盒，包括样本前处理试剂和检测试剂；

样本前处理试剂包含：酸化液、酰化缓冲液、酰化剂溶液；酰化剂溶液中的酰化剂为乙酸酐、琥珀酸酐、丁酸酐、己酸酐、辛酸酐、乙酰氯、冰醋酸中的一种或几种；

检测试剂包含：包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液，甲氧基肾上腺素的特异性抗体溶液，含有辣根过氧化物酶标记抗抗体的酶结合物溶液，校准品；

或者，检测试剂包含：包被有甲氧基肾上腺素的磁微粒混悬液，含有辣根过氧化物酶标记的甲氧基肾上腺素特异性抗体的酶结合物溶液，校准品。