[发明专利]一种顶空-气相色谱法测定异硫蓝物中乙酸的方法

说明书

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种顶空‑气相色谱法测定异硫蓝物中乙酸的方法。本方法采用甲基异丁基酮制备供试品溶液和对照品溶液，再进行顶空‑气相色谱法检测。本发明采用的分析方法无需前处理，操作简单，灵敏度高，重现性好，结果准确。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种顶空-气相色谱法测定异硫蓝物中乙酸的方法。

背景技术

乙酸可作为药物合成反应底物溶剂，当反应完成或进行下一步反应时，乙酸的残留量会影响药物的质量及下一步的合成反应，且有根据ICH规定，药物中对乙酸限度规定在5000ppm以内，因此对于药物中含有乙酸残留尤其是像异硫蓝中含有乙酸残留此等重要类型药物来讲，检测出其中的乙酸含量是否达标是十分重要的。

现有对乙酸的分析方法有：气相色谱质谱法(GC-MS)、液相色谱质谱法(LC-MS)，以及2015版中国药典中提及到使用普通反相液相紫外色谱法(RPLC-UV)。使用气相色谱法，由于乙酸本身的极性大，通用型色谱柱会造成色谱峰拖尾，大部分都是运用一些极性色谱柱如WAX及FFAP-WAX。GC-MS为了提高其检测灵敏度，则需对乙酸进行衍生化后进行检测分析，但质谱价格昂贵，这对于大多数普通型药企中的使用不是很广泛。另外，异硫蓝在水和常规溶剂中的溶解度都很低，而乙酸的残留量在ppm级，运用液相色谱来分析灵敏度不高，顶空气相色谱操作简单，适宜对挥发化合物的检测，而由于乙酸本身显弱酸性，因此采用顶空气相色谱时溶剂不应考虑高沸点弱碱性如DMF，NMP等化合物。

中国申请专利201610113454.9公开了一种同时检测残留溶剂乙酸和乙酸乙酯的方法，该方法采用顶空气相色谱法，但前处理比较复杂。

发明内容

本方法采用甲基异丁基酮作为溶剂，采用顶空气相色谱氢火焰离子检测法就能实现对乙酸的分析，无需前处理，操作简单，灵敏度高，重现性好，结果准确，目前行业很少有报道在异硫蓝中对乙酸残留进行检测的分析方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种顶空-气相色谱法测定异硫蓝中乙酸的方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：精密称取异硫蓝置顶空瓶中，加入甲基异丁基酮溶解，作为供试品溶液；

(2)标准品溶液的制备：精密称取对照品乙酸置于顶空瓶中，加入甲基异丁基酮溶解，作为对照品溶液；

(3)设定顶空-气相色谱条件：

顶空条件：孵化室温度为85-95℃；

色谱条件：载气：氮气；色谱柱：以聚乙二醇为固定液(30m，0.53mm，1μm)；进样口温度：235-245℃，采用程序升温：起始温度75-85℃，维持0-2min，以6-8℃/min升至105-115℃，维持4-6min，再以19-21℃/min升至225-235℃，维持3-5min；

检测条件：检测器温度265-275℃。

(4)含量测定：使用外标法对异硫蓝中的乙酸残留量进行检验，取供试品溶液与对照品溶液，分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算异硫蓝中乙酸的残留量。

优选地，供试品溶液的浓度为200mg/ml。

优选地，顶空条件中定量环温度为105-115℃，传输线温度为115-125℃。

优选地，顶空条件中，顶空瓶平衡时间≥20min，加压时间0.4-0.6min，定量环填充时间0.2min，定量平衡时间0.05min。

优选地，顶空条件中，进样时间0.5-1.5min，柱温平衡时间0.05min,样品瓶压力21psi,定量环体积1mL。