[发明专利]CK20抗原、杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用有效

专利信息
申请号: 202011462032.5 申请日: 2020-12-11
公开(公告)号: CN112390895B 公开(公告)日: 2023-06-20
发明(设计)人: 王亚杰;徐星星;柴素真;张东辉;常秋霜;翟晋豫;刘文弟;刘畅;李三华;牛银银;齐华 申请(专利权)人: 河南赛诺特生物技术有限公司
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C07K16/18;C12N15/70;C12N5/20;G01N33/577;G01N33/68;G01N33/574
代理公司: 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 代理人: 牛爱周
地址: 450001 河南省郑州*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: ck20 抗原 杂交瘤 细胞株 单克隆抗体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种CK20抗原,其特征在于,是在人CK20蛋白头部与尾部片段之间加入连接元件获得的融合蛋白,具体由以下结构组成:

1)第一序列:人CK20蛋白头部,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;

2)连接元件:(GGGGS)n,n=3,氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示;

3)第二序列:人CK20蛋白尾部,氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.如权利要求1所述的CK20抗原的制备方法,其特征在于,将CK20的头部核苷酸序列SEQ ID NO:2和尾部核苷酸序列SEQ ID NO:4中间加入连接元件的核酸序列SEQ ID NO:6,人工合成后克隆进入pET-28a表达载体中,构建pET-28a-CK20-Linker表达载体,转化大肠杆菌,表达纯化获得CK20抗原。

3.如权利要求1所述的CK20抗原作为免疫原在制备抗CK20抗体中的应用。

4.一种鼠抗人CK20单克隆抗体杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株为:C7C11,保藏编号:CCTCC NO:C2020201。

5.一种鼠抗人CK20单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体由权利要求4所述的杂交瘤细胞株C7C11分泌获得。

6.如权利要求5所述的鼠抗人CK20单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将如权利要求4所述的鼠抗人CK20单克隆抗体杂交瘤细胞株接种至小鼠腹腔,采集腹水后,经纯化获得单克隆抗体。

7.如权利要求5所述的鼠抗人CK20单克隆抗体在制备CK20体外免疫检测试剂或试剂盒中的应用。

8.一种CK20免疫组化检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括一抗试剂,所述一抗试剂包括如权利要求5所述的鼠抗人CK20抗体。

9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括过氧化物酶封闭液、二抗试剂、DAB显示底物、DAB显色缓冲液、苏木素染色液,所述二抗试剂为HRP-标记的羊抗鼠/兔多聚物。

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