[发明专利]一种用于检测β淀粉样蛋白的基因序列组、杂交瘤细胞组及胶乳增强免疫比浊法试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测β淀粉样蛋白的基因序列组，其特征在于：包括基因片段一、基因片段二和基因片段三，所述基因片段一的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，所述基因片段二的DNA序列如SEQ ID NO.2所示，所述基因片段三的DNA序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种用于检测β淀粉样蛋白的杂交瘤细胞组，其特征在于：包括杂交瘤细胞一、杂交瘤细胞二和杂交瘤细胞三，所述杂交瘤细胞一由经基因片段一的表达产物免疫的细胞和骨髓瘤细胞融合而成，所述杂交瘤细胞二由经基因片段二的表达产物免疫的细胞和骨髓瘤细胞融合而成，所述杂交瘤细胞三由经基因片段三的表达产物免疫的细胞和骨髓瘤细胞融合而成。

3.一种β淀粉样蛋白的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于：包括试剂R1和试剂R2；

所述试剂R1包括如下组分：

所述试剂R2包括如下组分：

所述Aβ-latexMIX由三株单克隆抗体Aβ1-mab、Aβ2-mab、Aβ3-mab分别交联至聚苯乙烯胶乳微球后混合而成。

4.如权利要求3所述的β淀粉样蛋白的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于：所述三株单克隆抗体Aβ1-mab、Aβ2-mab、Aβ3-mab分别选用如权利要求2所述的杂交瘤细胞一、所述的杂交瘤细胞二和所述的杂交瘤细胞三分泌的抗体。

5.如权利要求3或4所述的β淀粉样蛋白的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于：所述Aβ-latexMIX的制备方法如下：

5.1用活化缓冲液悬浮聚苯乙烯胶乳微球，得到微球活化液；

5.2向微球活化液中加入EDC，室温孵育，然后再次加入EDC，继续室温孵育，得到微球孵育液；

5.3用包被缓冲液清洗微球孵育液，然后将得到的聚苯乙烯胶乳微球悬浮在包被缓冲液中，得到微球悬浮；

5.4用包被缓冲液溶解Aβ1-mab，得到Aβ1-mab抗体溶液；

5.5将Aβ1-mab抗体溶液加入微球悬液中，持续搅拌室温孵育，得到反应溶液；

5.6向反应溶液中加入乙醇胺，持续搅拌室温孵育，得到交联混合液；

5.7用储存缓冲液悬浮交联混合液，移除未结合的抗体和乙醇胺，获得Aβ1-mab的胶乳微球Aβ1-latex；

5.8按照上述操作，获得Aβ2-mab、Aβ3-mab的胶乳微球Aβ2-latex、Aβ3-latex；

5.9将Aβ1-latex、Aβ2-latex、Aβ3-latex按2：2：3混合，获得Aβ-latexMIX。

6.如权利要求3或4所述的β淀粉样蛋白的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于：还包括试剂校准品，所述试剂校准品包括如下组分：

其中，rAβ1-3为三种目的蛋白rAβ1、rAβ2和rAβ3按1:1:1混合的混合物。

7.如权利要求3至6中任一项所述的β淀粉样蛋白的胶乳增强免疫比浊法试剂盒的测定方法，其特征在于：分析方法采用两点终点法，条件如下：

反应方向:上升反应；

校准方式:Logit-Log(5P)；

测定波长:570nm；

测定温度:37℃；

样本:试剂R1:试剂R2＝20:210:70(μL)

测试步骤：吸取20μL样本，加入210μL试剂R1，37℃孵育5min，加入70μL试剂R2，1min后读取吸光值A1，3min后读取吸光值A2，计算ΔA。