[发明专利]一种定量测定血液中阿比特龙的方法及应用

权利要求书

1.一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，具体包括：

S1：样品前处理

取血液样品，并在血液样品中加入内标工作液，涡旋振荡后离心，取上清液进样至液质联用仪中；

且所述血液样品为血浆或血清，且所述血液样品与所述内标工作液的体积比为1：10；

所述内标工作液具体配置过程包括：

S10：内标储备液：阿比特龙D4固体以二甲亚砜或甲醇溶解并定容，获得内标储备液；

S11：内标工作液：取内标储备液，以乙腈为溶剂进行逐级稀释得到内标工作液。

S2：测定阿比特龙的含量

分别根据设定的色谱条件和质谱条件测定所述上清液，得到色谱图和质谱图，并依据阿比特龙的标准曲线得出血液样品中阿比特龙的含量。

2.根据权利要求1所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，所述涡旋振荡时间5min；离心时间10min。

3.根据权利要求1所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，步骤S2中所述色谱条件为：

流动相A：0.5％甲酸-10mM甲酸铵水溶液；

流动相B：乙腈；

色谱柱：AgilentZORBAX Eclipse Plus-C18，规格2.1×50mm，5μm；

流速：0.1～1.0mL/min；

柱温：10～40℃；

等度洗脱比例：40～80％；

自动进样温度：0～30℃；

进样量：0.50～20.0μL；

分析时间：1.00～10.0min。

4.根据权利要求1所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，步骤S2中所述质谱条件为：

离子化模式：电喷雾离子化，正离子模式；

阿比特龙的离子对：350.3→156.1；

阿比特龙D4的离子对：354.2→160.1；

离子源参数：GS1＝10～60psig，GS2＝10～60psig，CAD＝1～20psig，CUR＝10～50psig，TEM＝100～550℃，IS＝2000～5500V，EP＝1～15V，CXP＝1～16V。

5.根据权利要求1所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，步骤S2中所述阿比特龙的标准曲线通过以下步骤获得：

S21：通过阿比特龙标准曲线工作液制备阿比特龙标准曲线样品，按照步骤S1进样，分别记录分析物和内标峰面积，计算分析物和内标峰面积比值；

S22：对阿比特龙的理论浓度进行线性回归，得到阿比特龙的标准曲线。

6.根据权利要求5所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，步骤S21具体包括以下操作：

先称取阿比特龙，以二甲亚砜溶解并定容，配制成阿比特龙储备液；再以甲醇为溶剂，将阿比特龙储备液逐级稀释即得到阿比特龙标准曲线工作液；

以空白犬血浆为空白基质，通过阿比特龙标准曲线工作液制备不同浓度阿比特龙标准曲线样品，按照步骤S1进样，分别记录分析物和内标峰面积，计算分析物和内标峰面积比值。

7.根据权利要求1-6任一所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法，其特征在于，还包括步骤S3：质控样品的配制及测定

先称取阿比特龙，以二甲亚砜溶解并定容，配制成阿比特龙储备液；再以甲醇为溶剂，将阿比特龙储备液逐级稀释即得到质控工作液；

以空白犬血浆为空白基质，通过质控工作液制备不同浓度质控样品，按照步骤S1进样，以质控样品确定分析数据的可靠性。

8.根据权利要求7任一所述的一种定量测定血液中阿比特龙的方法在阿比特龙临床前研究及阿比特龙制剂开发中的应用。